Вивчено біологічну активність кріоконсервованої сироватки кордової крові (СКК) у порівнянні з нативною СКК і замісною гормональною терапією в експериментальній моделі постгістеректомічного синдрому (ПГС). Обгрунтовано використання для лікування даної патології кріоконсервованої СКК за ефективних швидкостей заморожування й її зберігання у разі помірно низькій температурі. Одержані результати свідчать, що швидке заморожування СКК до -80 °С дозволяє запобігти можливій агрегації біомакромолекул і зберегти їх нативну конформацію, що у підсумку визначає збереження біологічної активності СКК у разі її застосування в експериментальній моделі ПГС. Показано, що зберігання СКК за температуру -80 °С протягом трьох місяців зберігає її здатність нормалізувати гормональну рівновагу за ПГС. Використання запропонованої температури (-80 °С) дозволяє зберігати та використовувати кріоконсервовану СКК у лікувальних установах, які не мають можливості утримувати низькотемпературні банки біологічних об'єктів на основі зрідженого азоту.

  Скачати повний текст

Об'єкт дослідження – вплив кріоконсервування еритроцитів ссавців з використанням багатокомпонентних кріоконсевуючих середовищ на рівень гемолізу еритроцитів та їх морфологічні властивості. Мета дослідження – створити ефективне комбіноване кріоконсервуюче середовище для еритроцитів ссавців (бика, коня і кролика) і дослідити збереженість клітин на етапах кріоконсервування. Методи дослідження: диференційна скануюча калориметрія, флуоресцентна мікроскопія, проточна цитофлуориметрія, спектрофотометрія та статистичний аналіз отриманих даних. Вперше показано фізичні процеси в суспензіях еритроцитів ссавців з комбінованими кріозахисними середовищами при охолодженні до -196 °С. Виявлено, що температура склування еритроцитів в комбінованих кріозахисних середовищах, які містять ПЕО-1500, ДМСО, 1,2-ПД і сахарозу підвищується в порівнянні з температурою склування однокомпонентних середовищ на основі ДМСО. Розроблене кріоконсервуюче середовище 15% ПЕО-1500, 10% ДМСО, 5% 1,2 ПД і 5% сахарози, яке має високу ефективність при кріоконсервуванні еритроцитів різних видів ссавців і є найбільш універсальним з досліджених на даний час кріозахисних розчинів.^UObject of research - influence of cryopreservation of mammalian erythrocytes using multicomponent cryopreservation media on the level of hemolysis of erythrocytes and their morphological properties. The purpose of the study is to create an effective combined cryopreservation medium for mammalian erythrocytes (bull, horse and rabbit) and to investigate the preservation of cells during the stages of cryopreservation. Research methods: differential scanning calorimetry, fluorescence microscopy, flow cytofluorometry, spectrophotometry and statistical analysis of the obtained data. For the first time, physical processes in mammalian erythrocyte suspensions with combined cryoprotective media when cooled to -196 °C were shown. It was found that the glass transition temperature of erythrocytes in combined cryoprotective media containing PEO-1500, DMSO, 1,2-PD and sucrose increases in comparison with the glass transition temperature of one-component media based on DMSO. Developed cryopreservation medium 15% PEO-1500, 10% DMSO, 5% 1.2 PD and 5% sucrose, which is highly effective in cryopreservation of erythrocytes of different mammalian species and is the most versatile of the currently studied cryoprotective solutions.