Досліджено особливості функціонування тирозинових протеїнфосфатаз (ТПФ-аз) у плазматичних мембранах, цитозолі спленоцитів та тимоцитів щурів через 12 годин після тотального рентгенівського опромінення у дозах 1,25; 0,5; 0,75 та 1,0 Гр. Виявлено найбільше зростання активності ТПФ-аз за умов впливу іонізуючої радіації у дозі 0,5 Гр, а для цитозольних ТПФ-аз спленоцитів - 0,25 Гр. Вивчено кінетичні властивості ізольованої ТПФ-ази CD 45. З'ясовано, що цей фермент більш споріднений з фосфатирозином, ніж з паранітрофеніфосфатом. Визначено, що опромінення тварин у дозі 0,5 Гр спричинює зниження спорідненості ферменту до фосфотирозину та зменшення максимальної швидкості фосфатазної реакції. Показано однонаправлені зміни активності тирозинових протеїнкіназ, ТПФ-аз та вмісту циклічних нуклеотидів у клітинах селезінки та тимусу щурів на тлі введення різних речовин за умов опромінення у низьких дозах.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Проаналізовано біохімічні механізми порушень у кисень-транспортній функції крові та функціональній активності еритроїдних клітин в організмі кролів і щурів у динаміці 28-добового введення хлориду кадмію (3 мг/кг маси). Показано, що під впливом кадмію пригнічується синтез гемоглобіну, прискорюється старіння еритроцитів і порушується стабільність мембран внаслідок стимуляції процесів пероксидного окиснення ліпідів та інгібування активності ферментів антиоксидантної системи та пентозофосфатного шунту гліколізу. Встановлено особливості адаптаційної відповіді системи еритрону на тривале надходження кадмію в організм тварин. Вперше показано відмінності в метаболічних реакціях еритроїдних клітин кісткового мозку та крові на отруєння катіонами кадмію, сприйнятливості клітин кролів і щурів до оксидативного стресу та впливу вітаміну E. Експериментально доведено коригувальний вплив alpha-токоферолу на кисень-транспортну функцію крові за умов тривалого надходження кадмію.

  Скачати повний текст

За результатами досліджень уперше експериментально встановлено, що надходження іонів кадмію в організм тварин зумовлює виникнення вільнорадикальної патології, спричиненої порушенням структурно-функціонального стану еритроцитів і гемоглобіну. Виявлено, що за умов кадмієвої інтоксикації відбуваються зміни жирнокислотного складу ліпідів і мають місце окиснювальні модифікації білків еритроцитів, що призводить до порушення структури біомембран. Показано, що інтоксикація іонами кадмію спричинює порушення в середовищі існування еритроцитів, які проявляються цими змінами та порушенням прооксидантно-антиоксидантної рівноваги в еритроцитах та плазмі крові. Розроблено концепцію біохімічних механізмів токсичної дії іонів кадмію на еритроцити, провідним з яких є оксидативний стрес, спричинений змінами лігандних форм гемоглобіну, порушенням процесів оксигенації тканин і розвитком гіпоксії, що призводить до морфологічних змін. Це визначено на підставі результатів цитологічних і електронномікроскопічних досліджень тканин нирок і печінки. Установлено, що у разі введення унітіолу та селеніту натрію зменшується токсична дія іонів кадмію на еритроцити, покращується функціональна здатність гемоглобіну, активізуються біохімічні реакції антоксидантного захисту, відбувається стабілізувальний вплив на структуру тканин печінки та нирок.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Вивчено взаємозв'язок між умовами середовища, процесами іонного транспорту та морфології еритроцитів людини, щура та півня. Вивчено особливості взаємодії мембрани еритроцитів з модифікаторами форми й інгібіторами аніонного транспорту за умов модифікації іонної сили та складу позаклітинного середовища. Установлено, що введення еритроцитів в ізотонічне середовище сахарози з низьким вмістом іонів хлору призводить до трифазної послідовності змін форми клітин (морфологічної відповіді (МВ)), складовими якої є швидкість сферуляції (фаза 1), відновлення форми близької до дискоїдної (фаза II) і повторної сферуляції (фази I) та повторної сферуляції (фази III). Установлено, що фази МВ залежать від іонної сили середовища та вмісту в ній іонів хлориду. Ефект модифікаторів на МВ залежить від їх типу, концентрації та моменту початку дії щодо трифазної послідовності трансформації, що розвивається. Показано, що для еритроцитів щура МВ за присутності та відсутності модифікаторів, відбувається у межах тих, що інвагінують, стоматоцитарних форм, що розрізняються за ступенем сферичності, а для еритроцитів людини у разі SDS, DIDS і альбуміну відбувається утворення ехіноцитів. Для еритроцитів півня трифазну МФ не виявлено.

  Скачати повний текст

Одержано нові дані про вплив різних аніонів, включених у середовище регідратації, на чутливість еритроцитів до постгіпертонічного лізису еритроцитів (ПГЛ). Встановлено, що у ряду "хлорид - піруват - сульфат - сахароза -цитрат" рівень ПГЛ залежить не від присутності у середовищі регідратації електроліт або неелектроліт, а від здатності аніонів проникати в клітини на етапі відновлення клітинного об'єму. Виявлено влив перерозподілу іонів у клітини на етапі інкубації у гіпертонічних середовищах на підвищення рівня ПГЛ. Вперше показано, що блокування вихідних потоків аніонів хлориду за допомогою інгібітору аніонного транспорту ДІДС і включення у клітини іонів натрію на етапі дегідратації під час обробки клітин нігерицином супроводжується збільшенням рівня ПГЛ. Виявлено, що модифікація мембрани ЙААЛ/ПХМБ усуває чутливість еритроцитів до ПГЛ в сахарозному та цитратному середовищах. Показано, що гіпертонічна обробка не порушує транспортної функції аніонного переносника еритроцитів - білка смуги 3.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Показано, що вивчені амфіфільні сполуки істотно знижують рівень гіпертонічного гемолізу еритроцитів. Встановлено, що їх антигемолітична активність визначається умовами гіпертонічного впливу на клітини, фізико-хімічними властивостями амфіфільних молекул і початковим станом клітин, сформованим на етапі попередньої інкубації в середовищах помірної тонічності за певних температур.

  Скачати повний текст

Показано, що барбітал, фенобарбітал, лідокаїн підвищують стійкість еритроцитів за умов гіпертонічного кріогемолізу та гіпертонічного шоку, однак не змінюють чутливість клітин у разі постгіпертонічного лізису. Доведено, що барбітурати та лідокаїн змінюють функціональну активність аніонного транспортера. Встановлено, що зміна транспортної активності залежить від осмолярності середовища. Виявлено, що наявність у середовищі ДІДС і діпірідамолу впливає на зміну активності білка смуги 3, викликану барбіталом, фенобарбіталом, лідокаїном. Доведено, що лідокаїн і ДІДС змінюють активність еритроцитарної ацетилхолінестерази, а характер змін залежить від складу середовища.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Досліджено роль форми еритроцитів як фактора, що може визначати чутливість клітин до ушкоджуючої дії літичних пептидів - мелітина та його аналога [Ala-14]-мелітина (Р14А), а також стійкість до кислотного гемолізу. Вивчено формотрансормуючий ефект модифікаторів різної хімічної природи та його вплив на перебіг галій-індукованої агрегації еритроцитів. Показано, що сполуки, які інгібують проникність мембрани є інгібіторами кислотного гемолізу, а речовини, які збільшують проникність - активаторами даного процесу. Встановлено, що речовини, які не впливають на проникність, незалежно від їх здатності змінювати форму клітин, не впливають на кислотний гемоліз еритроцитів.

  Скачати повний текст

Досліджено вплив основних медіаторних систем організму на манозомісні мембранні структури (МММС) лейкоцитів. Розглянуто дію синтетичного антиоксиданту мексидолу та інсуліну, як ростового фактора, на експресію МММС лейкоцитів. Встановлено, що лімфоцити та поліморфноядерні лейкоцити реагують на дію інсуліну посиленням експресії їх МММС. Доведено, що за умов зміни медіаторних систем організму за експериментальних патологій (гострий стрес, інтоксикація тетрахлорметаном, фенілгідразинова анемія, аутоімунний нефрит) органні пептидні комплекси та пептидні фрагменти гемоглобіну регулюють функціональний стан клітин імунної системи.

  Скачати повний текст

Показано, що в основі біохімічних порушень, які зумовлюють зміни структурно-функціонального стану лейкоцитів за умов хронічного рентгенівського опромінення, лежить значне зростання продукції оксиду азоту (NO), викликане зміною співвідношення інтенсивності окисного та неокисного шляхів обміну L-аргініну за рахунок зростання активності NO-синтази на фоні інгібування аргінази. Активація апоптозу в імунокомпетентних клітинах крові за умов опромінення пов'язана з гіцерпродукцією NO. Зміни у структурі та кількості вуглеводних детермінант глікопротеїнів, експонованих на мембранах лейкоцитів на фоні впливу радіаційного чинника, є провідними механізмами, що зумовлюють зміни морфо-функціонального стану цих клітин. Виявлено, що L-NAME як неселективний інгібітор NOS є чинником, що має здатність запобігати генетично запрограмованій загибелі клітин імунної системи через інгібування токсичної та проапоптичної дії оксиду азоту за умов рентгенівського опромінення. Запропоновано на основі L-NAME проводити пошук і розробку препаратів, які запобігатимуть розвиткові або коригуватимуть ускладнення, що опосередковуються лейкоцитами периферичної крові за умов тривалого рентгенівського опромінення.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Розроблено й апробовано новий метод визначення щільності розподілу еритроцитів за індексом сферичності, показано можливості його використання в кріобіологічних дослідженнях. З'ясовано, що характеристика, одержана за допомогою розробленого методу, є чутливим інформативним показником для кількісної оцінки стану популяції еритроцитів, що дозволяє здійснити попереднє забракування нездатних для низькотемпературного консервування зразків. Одержано числові значення індексів сферичності центрів розподілів у популяціях еритроцитів здорових дорослих донорів, які відповідають відомим величинам об'єму та площі поверхні цих клітини. Виявлено, що у разі спрямованого впливу хлорпромазину на форму еритроцитів криві щільності їх розподілу за індексом сферичності адекватно відображають склад популяції за поверхнево-об'ємним відношенням. Встановлено, що у разі експозиції еритроцитів у гіпертонічних середовищах стан клітин змінюється залежно від часу її дії та ступеня гіпертонічності середовища. З'ясовано, що в середовищах з помірною гіпертонією (0,4 та 0,8 M NaCl) у перші 30-90 сек. експозиції зменшується кількість клітин у діапазоні малих індексів сферичності (P = 1 - 1,3). Показано, що у разі збільшення тривалості експозиції до 3 - 10 хв число клітин з малим індексом сферичності збільшується, що є причиною підвищення чутливості клітин до наступного охолодження. Виявлено, що збільшення частки еритроцитів з малим індексом сферичності за експозиції в 0,4 та 0,8 M розчинах хлориду натрію в часовому інтервалі 3 - 10 хв не пов'язано з витоком іонів калію з клітин. За експозиції в 1,2 та 2 M розчинах хлориду натрію суттєвий витік внутрішньоклітинного калію стає основним чинником, який впливає на розподіл еритроцитів за індексом сферичності за наступного їх вміщення в ізотонічне середовище.

  Скачати повний текст

Досліджено регуляторну дію комплексу пептидних фрагментів гемоглобіну (КПФГ) на гематологічні показники крові та кісткового мозку, перекисне окислення ліпідів, гемостаз, імунітет за фізіологічних умов та під час дії критеріїв, що моделюють стан системи крові. Доведено, що КПФГ стимулює процеси проліферації та диференціювання клітин-попередників мієлоїдного та еритроїдного ростків, знижує експресію манозовміщувальних мембранних структур лейкоцитів, стабілізує антиоксидантний гомеостаз та процеси гемокоагуляції, моделює клітинний та гуморальний імунітет. Визначено механізм підвищення фагоцитарної активності нейтрофілів внаслідок дії КПФГ за фізіологічних умов та у процесі відтворення внутрішньосудинного гемолізу. Розглянуто механізми апоптозу клітин кісткового мозку у разі патології системи крові. Встановлено, що даний комплекс призупиняє процес апоптозу у клітинах кісткового мозку, позитивно впливає на експресію онкопротеїну bcl-2 та негативно на експресію ядерного білка p53.

  Скачати повний текст

Простежено взаємозв'язок даних процесів із стійкістю клітин до кріоконсервування. Встановлено взаємозв'язок між характером та спрямованістю змін форми еритроцитів. Визначено роль білків спектрин-актинового комплексу в підвищенні стійкості клітин до заморожування за допомогою температурної та хімічної модифікації примембранних білків. Досліджено , що спрямованість структурної модифікації плазматичних мембран та білків цитоскелета визначено впливом температури та рівнем дегідратації на системи. Дане твердження пов'язано із змінами концентрації внутрішньоклітинного кальцію та рівнем фосфорування білків. Досліджено стійкість бар'єрних властивостей плазматичної мембрани еротроцитів та систем транспорту іонів і метаболітів залежно від температури інкубації клітин із кріопротектором ПЕО-1500 та після заморожування-відігрівання. Розроблено безвідмінний спосіб кріоконсервування еритроцитів на підставі принципу попередньої холодової стабілізації. Проведено дослідження функціональної та структурної повноцінності еритроцитів.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Виявлено, що в середовищі, що містить NaCl в концентрації 4,0 моль/л, за 37°С максимальний рівень гемолізу спостерігається для еритроцитів людини та бика, мінімальний - еритроцитів собаки та кролика. Встановлено, що за температури інкубації 0°С чутливість еритроцитів тварин до гіпертонічного шоку значно нижча, ніж за 37°С. Визначено, що чутливість еритроцитів різних видів ссавців до гіпертонічного кріогемолізу є різною. Представлено температурні діапазони розвитку гіпертонічного кріогемолізу еритроцитів ссавців. Виявлено високу антигемолітичну активність хлорпромазину за умов гіпертонічного гемолізу та гіпертонічного кріогемолізу по відношенню до досліджуваних клітин. Обгрунтовано, що універсальний характер залежності гіпертонічного кріогемолізу еритроцитів різних видів ссавців від часу реалізується у разі варіювання значень осмолярності та температури середовища.

  Скачати повний текст