Цель работы - изучить паттерн экспрессии эндотелиальной, индуцибельной и нейрональной NO-синтаз в панкреатических островках (ПО) поджелудочной железы потомков самок с экспериментальным гестационным диабетом (ЭГД) в препубертатном периоде (возраст - 3 месяца). Исследования проведены на 10 самцах крыс - потомков самок с нормальной беременностью и 10 потомках самок с ЭГД. Для анализа состояния системы монооксида азота в гистологических срезах ПО исследовали экспрессию нейрональной, индуцибельной и эндотелиальной изоформсинтазы оксида азота. В ходе исследования установлено, что у контрольных крыс наибольшая площадь фермента была характерной для эндотелиальной изоформы, в то время как содержание иммунореактивного материала фермента (ИРМ) было максимальным для индуцибельной. Хроническая гипергликемия плода приводит к изменению распределения изоформ в ПО, отмечается большее содержание ИРМ к nNOS, увеличение площади ИРМ к iNOS и максимальные, по сравнению со всеми показателями экспрессии изоформ, значения площади и содержания ИРМ к eNOS. По нашему мнению, нарушение гомеостаза глюкозы у плода в последнем триместре беременности меняет соотношение паттернов экспрессии изоформ NOS в ПО поджелудочной железы, что может стать вероятной причиной формирования сахарного диабета в зрелом возрасте.

Цель работы - установить особенности паттерна экспрессии изоформ NOS в продольном и поперечном слоях миокарда левого желудочка (МЛЖ) сердца крыс-самцов (возраст - 3 месяца), потомков самок с экспериментальным гестационным диабетом (ЭГД). Исследования были проведены на 10 самцах крыс, потомков самок с нормальной беременностью и 10 потомках самок с ЭГД. Для анализа состояния системы монооксида азота в гистологических срезах миокарда отдельно в продольном и поперечном слоях исследовали экспрессию нейрональной, индуцибельной и эндотелиальной изоформсинтазы оксида азота (ОА) (Nos). Для анализа паттерна экспрессии изоформ фермента NOS в 5 мкм гистологических срезах МЛЖ сердца проводили комплекс иммуноцитохимических исследований. Гистологические срезы распределяли на 3 группы: первую группу срезов инкубировали с кроличьими IgGк нейрональной синтазе ОА (nNos) (Santa Cruz Biotechnology, USA) в разведении 1:200; вторую группу срезов инкубировали с кроличьими IgG антителами к эндотелиальной синтазе ОА (eNos) (Santa Cruz Biotechnology, USA) в разведении 1:200; третью группу срезов инкубировали с мышиными IgG к индуцибельной синтазе ОА (iNos), конъюгированной с FITC (Santa Cruz Biotechnology, USA) в разведении 1:200. Микроизображение МЛЖ, которое было получено на микроскопе AXIOSKOP, через высокочувствительную видеокамеру COHU 4922 (COHU Inc., США) вводилось в компьютерную систему цифрового анализа изображения VIDAS-386 (Kontron Elektronik, ФРГ). В ходе исследования установлено, что пренатальная гипергликемия приводит к существенным изменениям экспрессии изоформ NOS в МЛЖ у 3-месячных потомков самок с ЭГД, при этом содержание и распределение энзимов зависит от типа фермента и его локализации в мышечных слоях. Для eNOS характерно повышение экспрессии и распределения в обоих слоях МЛЖ, для nNOS и iNOS, наоборот, характерно снижение экспрессии фермента в поперечных мышцах миокарда с повышением её в продольном слое. Выводы: нарушение гомеостаза глюкозы у плода в последнем триместре беременности изменяет соотношение паттернов экспрессии изоформ NOS в МЛЖ и нарушает их баланс в отдельных слоях, что, вероятно, может стать причиной формирования сердечно-сосудистой патологии в зрелом возрасте.

Уперше встановлено патогенетичний зв'язок порушення стану системи монооксиду азоту міокарда лівого шлуночка серця, внаслідок хронічної гіперглікемії плоду, із метаболічними порушеннями, нейровегетативним та гормональним дисбалансами у препубертатному періоді. Показано, що пренатальна гіперглікемія призводить до багатокомпонентних змін у системних нейрогуморальних і локальних (монооксиду азоту) контурах регуляції метаболізму. Уперше доведено, що комплекс нейро-гормонально-метаболічних порушень формується у препубертатному віці паралельно із змінами розподілу та співвідношення показників експресії всіх трьох ізоформ NOS в панкреатичних острівцях підшлункової залози й шарах міокарда лівого шлуночка. Встановлено, що пренатальна гіперглікемія призводить до багатокомпонентних змін у системних нейро-гуморальних і локальних (монооксиду азоту) контурах регуляції метаболізму. Порушення глюкозостимульованої секреції інсуліну β-клітинами панкреатичних острівців, гормонального балансу, показників вуглеводного та жирового обмінів у нащадків самиць із ЕГД пов'язано із особливостями стану локальної регуляторної системи монооксиду азоту панкреатичних острівців підшлункової залози: порушенням розподілу та співвідношення показників експресії ізоформ NOS. Уперше доведено, що комплекс нейро-гормонально-метаболічних порушень у щурів-самців, що зазнали впливу пренатальної гіперглікемії, сформовано у препубертатному віці паралельно із змінами експресії всіх трьох ізоформ NOS в шарах міокарда лівого шлуночка та можуть стати предикторами розвитку серцево-судинної патології. Уперше показано, що в інтактних щурів в міокарді більш високі показники експресії ізоформ NOS у поперечному шарі, ніж у поздовжньому. У самців, нащадків самок із ЕГД, встановлено протилежні зміни експресії nNOS та iNOS у окремих шарах міокарда: відбувається зниження всіх досліджуваних показників обох ізоформ у поперечних волокнах нижче показників контролю, але їх збільшення у поздовжніх шарах.