Індекс рубрикатора НБУВ: Р264.919-4

Рубрики:

Інші віруси (снід, герпес та ін.)

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Проблема ранней диагностики вируса иммунодефицита человека остается актуальной и может быть решена путем внедрения в лабораторную практику высокочувствительных диагностических иммуноэнзимных тест-систем 4-го поколения. Преимуществом этого комбинированного анализа является возможность одновременного определения в сыворотке крови антигена p24 ВИЧ-1 и суммарных ВИЧ-специфических антител (IgG, IgM, IgA), что позволяет выявлять инфекцию на ранних этапах развития. В ЧАО "НПК Диапроф-Мед" разработана модифицированная версия тест-системы 4-го поколения DIA-HIV-Ag/Ab повышенной чувствительности, в которой использована смесь синтетических аналогов вирусных антигенов в составе иммуноэнзимных конъюгатов на двух этапах реакции. Значительное усиление специфического сигнала достигается введением в систему стрептавидина, конъюгированного с полимерной формой пероксидазы хрена. Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению 1-го Международного стандарта WHO HIV p24 (NIBSC) составила 0,78 МЕ/мл. Способность тест-системы выявлять раннюю ВИЧ-инфекцию, исследованная на 9 сероконверсионных панелях сывороток (7 - производства ZeptoMetrix Corp. и 2 - SeraCare Life Scien ces, CША), сопоставима с ее аналогами ведущих фирм-производителей тест-систем. Диагностические характеристики тест-системы проверены на стандартных панелях, включающих разведенные сыворотки крови ВИЧ-инфицированных, и неразведенных сыворотках с антителами к ВИЧ-1 (1 869 образцов) и ВИЧ-2 (41 образец). В этих исследованиях тест-система позволяла выявить ВИЧ с бульшим соотношением ОП/ГЗ по сравнению с аналогичными коммерческими тест-системами 4-го поколения. Диагностическая специфичность тест-системы DIA-HIV-Ag/Ab по результатам, полученным при исследовании крови доноров из различных учреждений службы крови Украины (93 788 исследований), составила 99,95 %.

Цель работы - исследование диагностических возможностей иммуноферментной тест-системы DIA-Trep-different (ЧАО "НПК "Диапроф-Мед", Киев), предназначенной для дифференцированного определения антител к наиболее иммуногенным антигенам T. pallidum, по сравнению с общепринятыми лабораторными методами и иммуноблоттингом. Способность тест-системы DIAl-Trep-different выявлять антитела к T. pallidum проверена на панели сывороток/плазмы крови PSS201 (BBI), состоящей из 23-х положительных на сифилис образцов и 2-х отрицательных, а также на 154-х сыворотках крови больных сифилисом разных стадий заболевания. Диагностические возможности тест-системы изучены в сравнительных исследованиях с помощью реакции Вассермана (РВ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) и реакции микропреципитации РМП. При дифференцированном определении антител к антигенам T. pallidum в качестве тест-системы сравнения использован линейный иммуноблоттинг "Лайн-Блот Сифилис" (ЗАО "ЭКОлаб"). Тест-система DIA-Trep-different все 23 сыворотки панели PSS201, содержащие антитела к T. pallidum, определила как положительные. В 20-ти образцах обнаружены антитела к Тр15, Тр17, Тр41 Тр47, в 1 і к Тр15, Тр17, Тр41, в 2 і к Тр15, Тр17. При исследовании сывороток больных сифилисом тест-система DIA-Trep-different диагностировала заболевание на всех стадиях развития патологического процесса, в том числе раннюю и скрытую формы инфекции, тогда как в некоторых образцах РВ и РМП не выявляли специфических антител. Способность иммуноферментной тест-системы определять антитела к антигенам возбудителя была сопоставима с иммуноблоттингом. Однако тест-система позволяла исключить субъективный фактор при учете результатов анализа, поскольку он проводится в автоматическом режиме. Выводы: иммуноферментная тест-система DIA-Trep-different по способности выявлять антитела к T. pallidum не уступает общепринятым методам серодиагностики РВ, РПГА, РМП и является более информативной, поскольку определяет антитела к отдельным антигенам возбудителя. Тест-система DIA-Trep-different по способности дифференцированного определения специфических антител не уступает иммуноблоттингу "Лайн-Блот Сифилис" и позволяет проводить учет результатов в автоматическом режиме, упрощая и сокращая по времени диагностическую процедуру.

Розглянуто проблему діагностики ВІЛ-інфекції населення у групах високого ризику та в більш захищених соціальних групах. Увагу приділено пошуку шляхів розробки, вдосконалення наявних вітчизняних ІФА (імуноферментного аналізу) тест-систем, дослідження антивірусної дії потенційних лікарських засобів і визначення їх специфічної дії. Розроблено схему виявлення антигену p24 ВІЛ-1 у культурі клітин при проведенні досліджень антивірусної дії лікарських засобів за допомогою створеної тест-системи "DIA-HIV-Ag/Ab". Виявлено анти-ВІЛ активність біологічно-активної речовини з рослинного флавоноїду Протефлазіду. Методом докінгу показано взаємодію флавоноїдного циклу зі зворотною транскриптазою ВІЛ. Запропоновано та розроблено умови одержання МКАТ (моноклональних антитіл) і кон'югатів із біотином, стабільних пероксидазних кон'югатів з оригінальними рекомбінантними антигенами ВІЛ-1 і ВІЛ-2. Сконструйовано на їх основі імуноферментну систему четвертого покоління для виявлення антигену та ВІЛ-специфічних антитіл, проаналізовано чутливість і специфічність даного діагностичного набору, що за цими показниками не поступається світовим аналогам ІФА систем четвертого покоління. Запроваджено у виробництво імуноферментну тест-систему четвертого покоління для одночасного виявлення антитіл до ВІЛ 1/2 та антигену p24 ВІЛ-1 "DIA-HIV-Ag/Ab". Тест-система пройшла державну реєстрацію та отримала СЕ (Conformité Européenne) маркування згідно з нормативами ЄС. Перевірку якісних характеристик тест-системи проведено в Інституті Пауля Ерліха (Німеччина), Інституті тропічної медицини (Нідерланди), Інституті патології крові і трансфузійної медицини НАМН України, Центрах СНІДу та СПК (станціях переливання крові).