На культурі низької щільності нейронів гіпокампа щурів із використанням методики петч-клемп у конфігурації "ціла клітина" та прямої позаклітинної стимуляції нейритів досліджено гальмівну передачу через синаптичний контакт пари нейронів. Встановлено, що зі збільшенням тривалості культивування нейронів середня амплітуда викликаних гальмівних постсинаптичних струмів (вГПСС) і варіабельність їх амплітуд істотно збільшувалися. Значення часу наростання постсинаптичного струму збільшувались із зростанням і диференціацією нейронів, але ця зміна не була монотонною. Коефіцієнт варіації значень амплітуди струмів і стала часу спада струму, що відображувала властивості постсинаптичної мембрани синаптичних контактів, у перебігу культивування не змінювались. Отримані дані свідчать про збільшення під час синаптогенезу кількості елементарних гальмівних синаптичних контактів між нейронами гіпокампа; водночас можна вважати, що зміни в механізмі передачі на рівні окремого синаптичного контакту менш істотні.

Проведено кількісну оцінку дії блокатора рецепторів гамма-аміномасляної кислоти (ГАМК) бікукуліну на ГАМК-активовані трансмембранні іонні струми в ізольованих нейронах спінальних гангліїв щурів, викликані короткочасним (20 мс) локальним прикладенням ГАМК. Залежність між ступенем пригнічення ГАМК-активованих іонних струмів і концентрацією бікукуліну має нелінійний характер і може бути задовільно описана зворотною логістичною функцією. Бікукулін у дослідженому діапазоні концентрацій не впливає на кінетичні параметри зростання та спаду іонного струму.

Ключ. слова: спинной мозг, спинальные ганглии, совместная культура, спонтанная постсинаптическая активность
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.175

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: ГАМК, ГАМК_А-рецепторы, нейроны спинальных ганглиев
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.132

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

В условиях совместной культуры нейронов спинальных ганглиев и спинного мозга новорожденных крысят с использованием методики фиксации потенциала в конфигурации "целая клетка" в нейронах спинальных ганглиев исследовались эффекты, которые вызывались внеклеточной локальной электрической стимуляцией клетки, по своим морфологическим характеристикам соответствующей нейрону спинного мозга. Такая стимуляция в 9 % случаев приводила к возникновению постсинаптического тока (ПСТ) в нейроне спинального ганглия. Средняя задержка таких токов (измеряемая от переднего фронта стимула) составляла 4,7 +- 0,29, среднее значение их времени нарастания - 2,6 +- 0,77, а постоянная времени спада tau = 14,5 +- 1,04 мс. Потенциал реверсии вызванных ПСТ (вПСТ) был близок к равновесному потенциалу для ионов хлора, рассчитанному по уравнению Нернста. При аппликации 20 мкМ бикукуллина наблюдалось практически полное и обратимое блокирование вПСТ. Сделан вывод о том, что данные токи возникают в результате активации хлорных каналов, управляемых ГАМК-рецепторами, и, следовательно, представляют собой тормозящие ПСТ. Таким образом, можно считать доказанным, что нейроны спинного мозга могут образовывать функциональные тормозные синапсы на нейронах спинальных ганглиев.

На свіжоізольованих нейронах спінальних гангліїв щурів із використанням методу фіксації потенціалу в конфігурації "ціла клітина" та системи швидкої локальної суперфузії досліджено властивості трансмембранних іонних струмів, які виникали у відповідь на прикладання gamma-аміномасляної кислоти (ГАМК) у різних концентраціях. Встановлено, що збільшення концентрації ГАМК та тривалості її прикладання викликає зміни амплітудних і кінетичних параметрів трансмембранних струмів. Залежність між амплітудою та концентрацією ГАМК адекватно описано рівнянням Хілла. Наростання струмів апроксимувалося двома експонентами з різними сталими часу. З'ясовано, що стала часу другої експоненти змінювалася зі збільшенням концентрації та тривалості аплікації ГАМК, а перша експонента була нечутливою до цих змін. Спад струмів також апроксимувався двома експонентами. Стала часу першої експоненти часу не змінювалася за умов збільшення концентрації або тривалості прикладання ГАМК, а стала часу другої експоненти виявляла помітну залежність від часу аплікації. Оскільки середня щільність ГАМК-активованих іонних каналів у соматичній мембрані нейронів спінальних гангліїв є досить великою, можна припустити, що функціонування цих каналів робить помітний вклад у регуляцію провідності мембрани таких клітин.

Ключ. слова: нейроны гиппокампа, культура малой плотности, тормозные синапсы, вызванные тормозящие постсинаптические токи, кальциевые каналы
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.52*012

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.12

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: ВА652719 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: тормозящие постсинаптические токи, кора, амплитудное распределение
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.11*71

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: культура нейронов коры, ГАМК-активируемые токи, биномиальное распределение, аутокорреляция, квантовые характеристики
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.52*715.3

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: синапсы, совместная культура, спинной мозг, спинальные ганглии
Індекс рубрикатора НБУВ: Р252.797.5

Рубрики:

Порушення функцій спинного мозку

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

На синаптически связанных парах нейронов гиппокампа в условиях культивирования с использованием метода пэтч-клэмп в конфигурации "целая клетка" были изучены характеристики серий потенциалов действия (ПД), вызываемых стимуляцией пресинаптической единицы длительным (500 мс) толчком тока, и кинетические характеристики постсинаптических токов (ПСТ), вызванных такими ПД в постсинаптической единице. Пресинаптические тормозные единицы были идентифицированы как ГАМК-эргические интернейроны; по размерам и количеству отростков они были разделены на две группы. Кинетические характеристики ПСТ, вызванных в постсинаптическом нейроне сериями ПД пресинаптической клетки, обнаруживали определенную зависимость от морфологических характеристик этих клеток. В интернейронах, имеющих больший размер сомы, токи были более быстрыми по кинетике и имели потенциал реверсии, близкий к равновесному хлорному потенциалу; токи в интернейронах с меньшим размером сомы были более медленными и имели смещенный потенциал реверсий. Сделано заключение, что в условиях культивирования пресинаптическая клетка не только непосредственно вызывает ПСТ в постсинаптическом нейроне и определяет амплитуду этого тока, но и существенно влияет на его кинетику.

На культуре клеток гиппокампа с использованием метода пэтч-клемп в конфигурации "целая клетка" были изучены характеристики регулярных серий потенциалов действия (ПД), генерируемых с низкой частотой тормозными и возбуждающими интернейронами при их прямом электрическом раздражении длительными толчками тока (500 мс). Почти все параметры вызванной импульсной активности (за исключением частоты генерации и длительности ПД) у возбуждающих и тормозных нейронов статистически достоверно различались. Результаты иммуноцитохимического анализа показали, что в мембране возбуждающих нейронов (гранулярных клеток) экспрессировались калиевые каналы типов Kv1.2 и Kv4.2 и что во всех подобных клетках присутствовал соматостатин. Лишь часть тормозных интернейронов (крупные клетки) были иммунопозитивны по отношению к соматостатину; в тормозных нейронах экспрессировались калиевые каналы только типа Kvl.2. Таким образом, механизмы, отвечающие за способность интернейронов гиппокампа генерировать импульсную активность в условиях прямого раздражения (в нашем случае - регулярные серии ПД с низкой частотой), у тормозных и возбуждающих нейронов заметно различаются.

Ключ. слова: депрессия и облегчение при парной стимуляции, одиночный синапс, тормозящий постсинаптический ток, культура нейронов гиппокампа крысы
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

В культивируемых тормозных интернейронах гиппокампа крысы с использованием метода "пэтч-клэмп" в конфигурации "целая клетка" определено наличие калиевого тока (КТ) М-типа и его вклад в суммарный КТ, вызываемый деполяризацией клетки. С помощью иммуноцитохимического окрашивания проверено наличие в данных нейронах каналов KCNQ-семейства, ответственных за генерацию М-тока. Показано, что основная роль в процессах реполяризации мембраны тормозных интернейронов принадлежит неинактивирующимся калиевым каналам и каналам с медленной кинетикой инактивации. Во всех исследованных клетках в ответ на деполяризацию возникал неинактивирующийся со временем КТ с кинетическими параметрами, близкими к параметрам М-тока. У всех клеток выявлялась позитивная иммуноцитохимическая окраска в отношении KCNQ2-каналов, однако ее интенсивность значительно варьировала от нейрона к нейрону. Степень подавления неинактивирующегося КТ селективным блокатором KCNQ-каналов линопирдином в разных клетках заметно различалась; таким образом, уровень экспрессии данных каналов в исследованных интернейронах, видимо, существенно различен. Причиной неполного подавления М-тока, возможно, является участие в формировании этого тока других калиевых каналов (например, Kv1-семейства).

На препаратах верхнего шейного ганглия (ВШГ) 21-дневных крысят изучены внутриганглионарные проводящие пути и механизмы возникновения синаптических ответов в нейронах ВШГ при антидромной стимуляции. Стимулированы поочередно один из трех нервов, поступающих к ВШГ, а от двух других одновременно отведены суммарные потенциалы действия. При ортодромной стимуляции шейного симпатического нерва (ШСН) возникали ответы во внутреннем сонном нерве (ВСН), которые полностью блокировались бензогексонием, и ответы в наружном сонном нерве (НСН), которые включали в себя компонент, не блокируемый этим агентом. Антидромная стимуляция ВСН не вызывала ответов ни в ШСН, ни в НСН, в то время как стимуляция НСН приводила к появлению ответов в ШСН, которые не блокировались бензогексонием. Суперфузия ганглия бескальциевым раствором позволила установить, что не чувствительный к бензогексонию компонент ответов ШСН - НСН и проведение из НСН в ШСН опосредованы наличием волокон, проходящих из ШСН в НСН через ВШГ без синаптического переключения. Обсуждены возможные механизмы возникновения синаптических ответов в нейронах ВШГ при антидромной стимуляции.

Описана электрическая активность ганглиозных клеток сетчатки глаза крысы. Обнаружено, что большинство клеток генерируют активность тонического типа, тогда как клетки с фазной активностью относительно малочисленны.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*73 е(4УКР-4КИЇ-2К) л2

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

С использованием методов фиксации потенциала в конфигурации "целая клетка" и стимуляции отдельной пресинаптической терминали исследованы некоторые особенности высвобождения ГАМК в тормозных синапсах культивируемых нейронов спинного мозга крыс. В ходе анализа распределений амплитуд вызванных тормозящих постсинаптических токов определены основные квантовые параметры выброса медиатора. Показано, что в ГАМК-эргических синапсах спинальных нейронов, культивируемых в течение 9 - 11 дней, минимальное высвобождение передатчика осуществляется пакетами квантов (не менее двух - трех). При этом распределение количества высвобождаемых квантов достаточно хорошо соответствовало таковому, теоретически рассчитанному в соответствии с законами Пуассона. Предположено, что одновременный минимально двухквантовый выброс ГАМК в синапсах нейронов спинного мозга может быть связан с одновременным вовлечением в процесс возбуждения двух близко расположенных терминалей, каждая из которых обладает одной активной зоной, или одной терминали с двумя активными зонами.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.222.41

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ