Мета роботи - дослідження впливу ліпополісахаридів (ЛПС) ряду штамів Pantoea agglomerans на фібринолітичну, колагеназну та еластазну активності протеаз Bacillus. Еластазну активність визначали колориметрично, вимірюючи зміну інтенсивності забарвлення розчину під час ферментативного гідролізу еластину. Для встановлення колагеназної активності вимірювали оптичну густину розчину після реакції продуктів розщеплення колагену із нінгідриновим реактивом. Фібринолітичну активність ідентифікували за утворенням продуктів розщеплення фібрину. Одержані результати показали, що найбільш активними виявилися ЛПС двох штамів P. agglomerans: 8674 та П324. ЛПС P. agglomerans 8674 підвищував фібринолітичну активність пептидази 1 B. thuringiensis IMB B-7324 майже в 4 рази, еластолітичну пептидази 1 B. thuringiensis IMB B-7465 - удвічі, а колагеназну активність пептидази 2 B. thuringiensis IMB B-7324 - в 1,5 разу. ЛПС P. agglomerans П324 проявив більш вузький спектр стимулювальної дії на пептидазну активність: він більш, ніж в 4 рази підвищував фібринолітичну активність пептидази 1 B. thuringiensis IMB B-7324 і утричі - пептидази 2 Bacillus sp. ПЗ. Подальші дослідження будуть спрямовані на з'ясування деяких механізмів дії ЛПС грамнегативних бактерій на пептидазну активність бацил.

Мета роботи - охарактеризувати протеази Bacillus thuringiensis IMB B-7324 та B. thuringiensis var. israelensis IMB B-7465 із колагеназною, еластазною і фібринолітичною активністю, а саме: визначити їх молекулярну масу, якісний і кількісний вміст амінокислот і моносахаридів та порівняти ензими із різних продуцентів за дослідженими параметрами. Гомогенність ензимних препаратів визначали в денатуруючій (SDS-PAGE) і нашивній (гель-фільтрація на Sepharose 6В) системах. Визначення амінокислотного складу досліджуваних протеаз здійснювали за допомогою автоматичного амінокислотного аналізатора T339 ("Microtechna", Чехія). Ідентифікацію нейтральних моносахаридів ензимів проводили за допомогою методу хромато-мас-спектрометрії за методом Albershein зі співавт. Вперше показано, що протеази 1 і 2 B. thuringiensis IMB B-7324 та протеаза B. thuringiensis var. israelensis IMB B-7465 мають різні значення молекулярної маси (близько 25,8, 24,2 і 37,0 кДа відповідно) та подібний амінокислотний склад. Рівень полярних амінокислот протеази 1 B. thuringiensis IMB B-7324 в 1,5 разу нижчий, ніж в решти досліджених ензимів. Вперше показано, що дані протеази містять в своєму складі 1 або 2 моносахариди. Висновки: одержані результати демонструють відмінності амінокислотного і моносахаридного складу протеаз з колагеназною, еластазною і фібринолітичною активністю в межах виду B. thuringiensis, що вносить суттєвий вклад в його характеристику.

Цель работы - провести скрининг среди штаммов рода Bacillus, выделенных из глубоководного грунта (ГВГ) Черного моря, продуцентов с фибринолитической (ФА), эластазной (ЭА) и коллагеназной активностями (КА). При изучении протеолитической активности в качестве субстратов использовали казеин, фибрин, коллаген и конго-рот эластин. Содержание белка определяли методом Лоури. В результате скрининга среди 10 штаммов Bacillus, выделенных из ГВГ Черного моря, установлено, что супернатант культуральной жидкости Bacillus sp. О8 выявил высокую ФА, в то время как штаммы 98, 1 и 249 синтезировали пептидазы с ЭА и казеинолитической активностями (КЛА). КА не была выявлена ни у одного из исследуемых штаммов. Результаты исследований позволили отобрать среди представителей рода Bacillus, изолированных из ГВГ Черного моря, 4 штамма, которые являются перспективными для дальнейших исследований по выделению из них пептидаз с КЛА, ЭА и ФА.