Ключ. слова: хромаффинные клетки, катехоламины, секреция, везикулы, амперометрия, экзоцитоз, углеродное волокно, ацетилхолин, нейропередатчик
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.12

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Недавно розроблена методика електрохімічного виявлення секреції відкриває можливості для вивчення нейротрансмітерів,які вивільнюються із поодинокої клітини.Використовуючи метод швидкої циклічної вольтамметрії,ми досліджували властивості двох нейропередатчиків - серотоніну та дофаміну,котрі можуть одночасно вивільнюватись у процесі синаптичної передачі.Нами встановлено,що серотонін, і дофамін обумовлюють наявність одного піка окислення і одного піка відновлення.Відмінності амплітуди піків для серотоніну та дофаміну були статистично значущими тільки для піка відновлення.Пік відновлення для дофаміну в 3.65 раза перевищував аналогічний показник для серотоніну,тоді як піки окислення не були статистично відмінними.Ми встановили,що розташування піків відносно шкали потенціалу також може використовуватись для розрізнювання згаданих сполук.Так,електродні потенціали,при яких спостерігались максимуми піка відновлення для серотоніну та дофаміну,виявились статистично різними,а пік окислення дофаміну був зсунутим майже на 125 мВ у бік більш високих потенціалів.Результати тестування розчину,який вміщував суміш двох нейропередатчиків,показали,що сумарна вольтамограма являє собою просту суму двох окремих, "еталонних" вольтамограм для серотоніну та дофаміну.Останнє дає нам підстави вважати, що тестовані сполуки не взаємодіють одна з одною.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*732.2*725.382.1

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*697.72 + Е60*737.172 + Е60*697.31

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Визначено властивості електродів з карбоновими волокнами та показано адекватність їх використання в електрофізіологічних дослідженнях на рівні окремих клітин. Удосконалено метод ідентифікації медіаторів, що секретуються хромафінними клітинами та доведено ефективність його застосування під час реєстрації процесу екзоцитозу. Вивчено кінетичні характеристики процесу вивільнення медіаторів з окремої хромафінної клітини у разі малої тривалості стимулу, які можуть виникати за нормальних фізіологічих умов, з використанням принципово різних агентів, що викликають секрецію. Проаналізовано часову динаміку процесу екзоцитозу за екстремальних умов збудження клітини, які виникають у разі важких патологічних порушень в організмі, з використанням двох окремих способів ініціації процесу вивільнення, що існують у хромафінних клітинах. Охарактеризовано зміни часової динаміки окремої секреторної події у випадку різних типів стимуляції. Розроблено теоретичну модель, що адекватно описує зазначені процеси.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*697.31 + Е60*697.72 + Е60*737.172

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Вивчено роль одного з синаптичних білків родини SM-білків - Munc18 - у процесі екзоцитозу. Для цього використано мікроін'єкції антитіл до протеїну Munc18 (анти-Munc18) в ізольовані хромафінні клітини надниркової залози щура з метою пригнітити функцію цього протеїну. Секрецію катехоламінів виміряно за допомогою амперометричного методу з використанням карбонового мікроелектрода. Виключення функції Munc18 у досліджуваних клітинах призводило до значного пригнічення процесу секреції. У цьому випадку знижувалася частота секреторних подій і змінювалися кінетичні параметри секреторних піків - зменшувалась їх амплітуда і збільшувалася тривалість спаду. Зроблено висновок, що Munc18 є одним із синаптичних протеїнів, необхідних для забезпечення кальційзалежного екзоцитозу у хромафінних клітинах, і що він може специфічно впливати на розміри фузійних пор.

Відомо, що екзоцитоз забезпечує такі життєвоважливі процеси, як вивільнення нейромедіаторів у разі синаптичної передачі або гормонів під час секреції. Головний механізм здійснення екзоцитозу відбувається за допомогою спеціалізованого білкового комплексу, який називається SNARE-комплекс. Саме завдяки його активності зливаються везикулярна та плазматична мембрани та формується фузійна пора, через яку вміст везикул вивільняється назовні. Вважається, що саме синаптотагміни, які є кальційзалежними білками, відповідальні за ініціацію кальційзалежного екзоцитозу. Синаптотагміни розташовані на мембрані везикул і здатні зв'язувати два або три іони кальцію. Вивчено роль однієї з найбільш розповсюджених їх ізоформ - синаптотагміну-1 у процесі екзоцитозу. Щоб пригнітити функцію цього протеїну, використовували ін'єкцію антитіл до синаптотагміну-1 в ізольовані хромафінні клітини наднирникової залози щура. Секрецію катехоламінів виміряно за допомогою амперометричного методу. Показано, що пригнічення функції синаптотагміну-1 у досліджуваних клітин призводило до значного зменшення секреції. Зроблено висновок, що синаптотагмін-1 є одним із ключових протеїнів, необхідних для забезпечення кальційзалежного екзоцитозу у хромафінних клітин.

Амперометричним методом досліджено секреторну відповідь на вплив агентів хроматичних клітин щурів, одержаних за KCl-індукованої мембранної деполяризації та дії ацетилхоліну. Показано, що секреторні компоненти, які приймають участь у цих процесах, відрізняються. Розглянуто значення механізму відповіді нейросекреторної клітини на різні типи стимуляції.