На культурі низької щільності нейронів гіпокампа щурів із використанням методики петч-клемп у конфігурації "ціла клітина" та прямої позаклітинної стимуляції нейритів досліджено гальмівну передачу через синаптичний контакт пари нейронів. Встановлено, що зі збільшенням тривалості культивування нейронів середня амплітуда викликаних гальмівних постсинаптичних струмів (вГПСС) і варіабельність їх амплітуд істотно збільшувалися. Значення часу наростання постсинаптичного струму збільшувались із зростанням і диференціацією нейронів, але ця зміна не була монотонною. Коефіцієнт варіації значень амплітуди струмів і стала часу спада струму, що відображувала властивості постсинаптичної мембрани синаптичних контактів, у перебігу культивування не змінювались. Отримані дані свідчать про збільшення під час синаптогенезу кількості елементарних гальмівних синаптичних контактів між нейронами гіпокампа; водночас можна вважати, що зміни в механізмі передачі на рівні окремого синаптичного контакту менш істотні.

За допомогою методу фіксації потенціалу на цілій клітині досліджувались трансмембранні калієві струми в соматичній мембрані нейронів гіпокампа в умовах тривалого культивування. На основі активаційних характеристик та даних щодо фармакологічної чутливості був ізольований та описаний потенціалкерований калієвий струм А-типу, що швидко інактивується (КСШI). Транзієнтний КСШI активувався при потенціалах -50...-40 мВ та був чутливим до 4-амінопіридину (4-АП). Позаклітинне прикладення 5 мМ 4-АП призводило до зменшення амплітуди КСШI на 75 , в той час як прикладення 10 мМ тетраетиламонію не викликало її помітних змін. Кінетика активації КСШI описувалась однією експонентою в четвертому ступеню. При зміні потенціалу на мембрані від -40 до 30 мВ постійна часу активації варіювала від 2.8 до 1.5 мс. Кінетика інактивації описувалась однією експонентою з постійною часу, що змінювалась від 37 мс при -45 мВ до 18 мс при 40 мВ. Криві стаціонарної активації та інактивації описувалися рівнянням Больцмана; половинне значення рівня стаціонарної інактивації досягалось при -80 мВ, а стаціонарна активація - при -25 мВ. Кінетика виходу із стаціонарної інактивації описувалась однією експонентою з постійною часу 41 мс. Робиться припущення про те, що КСШI соматичної мембрани нейронів гіпокампа протікає через калієві канали типу Kv4.2.

Із застосуванням методу "петч-клемп" у конфігурації "ціла клітина" були досліджені кальцієві струми через соматичну мембрану культивованих за умов низької щільності нейронів гіпокампа щурів.В сомі всіх досліджених клітин виявлялись низько- та високопороговий компоненти кальцієвого струму.Низькопорогові струми активувались при мембранному потенціалі біля -75мВ та досягали максимальної амплітуди при -45+-4мВ,тоді як високопорогові - при 17+-6мВ.Низькопороговий кальцієвий струм на відміну від високопорогового слабко пригнічувався Cd2+ в малих концентраціях (10-20мкМ),тоді як Ni2+ однаково пригнічував кальцієві струми обох типів.Результати експериментів з органічними блокаторами каналів показали,що в більшості нейронів експресувались високопорогові кальцієві канали принаймні чотирьох типів: L,N,P та нечутливі до застосовуваних блокаторів (здогадно,R-тип).Блокатор кальцієвих каналів L-типу ніфедипін (10мкМ) блокував в середньому 22.7+-5.2,блокатор кальцієвих каналів N-типу omega-СТх-GVIA (1мкМ)-30.0+-5.0,блокатор кальцієвих каналів P-/Q-типів omega-Aga-IVA (200 нМ)-37.2+-13.3 інтегрального високопорогового струму.Резистентний компонент складав 15.7+-5.1 даного струму.Зроблено висновок про те,що при культивуванні з низькою щільністю нейрони гіпокампа експресують фармакологічно гетерогенну популяцію кальцієвих каналів; співвідношення каналів різних типів близьке до отриманого раніше на зрізах гіпокампа щурів.

Ключ. слова: спинной мозг, спинальные ганглии, совместная культура, спонтанная постсинаптическая активность
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.175

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

В условиях совместной культуры нейронов спинальных ганглиев и спинного мозга новорожденных крысят с использованием методики фиксации потенциала в конфигурации "целая клетка" в нейронах спинальных ганглиев исследовались эффекты, которые вызывались внеклеточной локальной электрической стимуляцией клетки, по своим морфологическим характеристикам соответствующей нейрону спинного мозга. Такая стимуляция в 9 % случаев приводила к возникновению постсинаптического тока (ПСТ) в нейроне спинального ганглия. Средняя задержка таких токов (измеряемая от переднего фронта стимула) составляла 4,7 +- 0,29, среднее значение их времени нарастания - 2,6 +- 0,77, а постоянная времени спада tau = 14,5 +- 1,04 мс. Потенциал реверсии вызванных ПСТ (вПСТ) был близок к равновесному потенциалу для ионов хлора, рассчитанному по уравнению Нернста. При аппликации 20 мкМ бикукуллина наблюдалось практически полное и обратимое блокирование вПСТ. Сделан вывод о том, что данные токи возникают в результате активации хлорных каналов, управляемых ГАМК-рецепторами, и, следовательно, представляют собой тормозящие ПСТ. Таким образом, можно считать доказанным, что нейроны спинного мозга могут образовывать функциональные тормозные синапсы на нейронах спинальных ганглиев.

Ключ. слова:
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522*02,025

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.12

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: ВА652719 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: кофеїн, синаптична передача, ГАМК
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: тормозящие постсинаптические токи, кора, амплитудное распределение
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.11*71

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Электрофизиологические свойства тормозных (ГАМКэргических) нейронов изучены на синаптически связанной паре культивируемых нейронов гиппокампа с использованием методики patch-clamp в конфигурации "целая клетка" в режиме парной регистрации. Наличие моносинаптических тормозных вызванных токов на постсинаптической клетке в ответ на потенциалы действия (ПД) в пресинаптической клетке служило надежным критерием для идентификации последней как ГАМКэргического интернейрона. Показано, что по типу электрической активности ГАМКэргические нейроны в диссоциированной культуре гиппокампа можно разделить на две группы: первая характеризуется высокочастотной генерацией ПД в ответ на стимуляцию импульсами тока продолжительностью 0,5 с, клетки из второй группы не способны к высокочастотной генерации ПД. Две группы клеток различались между собой по кинетическим характеристикам ПД, адаптационным характеристикам при непрерывной генерации ПД и тормозящему эффекту, оказываемому на постсинаптическую клетку. Локальная аппликация блокатора калиевых каналов 4-аминопиридина на сому нейронов первой группы в концентрации, селективно блокирующей тип калиевых каналов Kv3, вызывала обратимые изменения в кинетике ПД, частотых и адаптационных характеристиках при непрерывной генерации ПД. Сделан вывод о высоком уровне экспрессии Kv3 калиевых каналов в нейронах первой группы.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.1*02

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: культура нейронов коры, ГАМК-активируемые токи, биномиальное распределение, аутокорреляция, квантовые характеристики
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.52*715.3

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: синапсы, совместная культура, спинной мозг, спинальные ганглии
Індекс рубрикатора НБУВ: Р252.797.5

Рубрики:

Порушення функцій спинного мозку

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

На синаптически связанных парах нейронов гиппокампа в условиях культивирования с использованием метода пэтч-клэмп в конфигурации "целая клетка" были изучены характеристики серий потенциалов действия (ПД), вызываемых стимуляцией пресинаптической единицы длительным (500 мс) толчком тока, и кинетические характеристики постсинаптических токов (ПСТ), вызванных такими ПД в постсинаптической единице. Пресинаптические тормозные единицы были идентифицированы как ГАМК-эргические интернейроны; по размерам и количеству отростков они были разделены на две группы. Кинетические характеристики ПСТ, вызванных в постсинаптическом нейроне сериями ПД пресинаптической клетки, обнаруживали определенную зависимость от морфологических характеристик этих клеток. В интернейронах, имеющих больший размер сомы, токи были более быстрыми по кинетике и имели потенциал реверсии, близкий к равновесному хлорному потенциалу; токи в интернейронах с меньшим размером сомы были более медленными и имели смещенный потенциал реверсий. Сделано заключение, что в условиях культивирования пресинаптическая клетка не только непосредственно вызывает ПСТ в постсинаптическом нейроне и определяет амплитуду этого тока, но и существенно влияет на его кинетику.

На культуре клеток гиппокампа с использованием метода пэтч-клемп в конфигурации "целая клетка" были изучены характеристики регулярных серий потенциалов действия (ПД), генерируемых с низкой частотой тормозными и возбуждающими интернейронами при их прямом электрическом раздражении длительными толчками тока (500 мс). Почти все параметры вызванной импульсной активности (за исключением частоты генерации и длительности ПД) у возбуждающих и тормозных нейронов статистически достоверно различались. Результаты иммуноцитохимического анализа показали, что в мембране возбуждающих нейронов (гранулярных клеток) экспрессировались калиевые каналы типов Kv1.2 и Kv4.2 и что во всех подобных клетках присутствовал соматостатин. Лишь часть тормозных интернейронов (крупные клетки) были иммунопозитивны по отношению к соматостатину; в тормозных нейронах экспрессировались калиевые каналы только типа Kvl.2. Таким образом, механизмы, отвечающие за способность интернейронов гиппокампа генерировать импульсную активность в условиях прямого раздражения (в нашем случае - регулярные серии ПД с низкой частотой), у тормозных и возбуждающих нейронов заметно различаются.

Ключ. слова: депрессия и облегчение при парной стимуляции, одиночный синапс, тормозящий постсинаптический ток, культура нейронов гиппокампа крысы
Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Електрофізіологічні експерименти проведено на культивованих нейронах гіпокампа щурів. Для вимірювання викликаних гальмівних постсинаптичних струмів (вГПСС) застосовано методики фіксації потенціалу та зовнішньої стимуляції окремого пресинаптичного аксона. Зроблено висновок, що тапсигаргін (1 мкМ) є здатним модулювати синаптичну передачу, в одних нейронах зменшуючи, а в інших - збільшуючи амплітуду вГПСС, причому кінетичні параметри цих струмів залишаються незмінними.

В культивируемых тормозных интернейронах гиппокампа крысы с использованием метода "пэтч-клэмп" в конфигурации "целая клетка" определено наличие калиевого тока (КТ) М-типа и его вклад в суммарный КТ, вызываемый деполяризацией клетки. С помощью иммуноцитохимического окрашивания проверено наличие в данных нейронах каналов KCNQ-семейства, ответственных за генерацию М-тока. Показано, что основная роль в процессах реполяризации мембраны тормозных интернейронов принадлежит неинактивирующимся калиевым каналам и каналам с медленной кинетикой инактивации. Во всех исследованных клетках в ответ на деполяризацию возникал неинактивирующийся со временем КТ с кинетическими параметрами, близкими к параметрам М-тока. У всех клеток выявлялась позитивная иммуноцитохимическая окраска в отношении KCNQ2-каналов, однако ее интенсивность значительно варьировала от нейрона к нейрону. Степень подавления неинактивирующегося КТ селективным блокатором KCNQ-каналов линопирдином в разных клетках заметно различалась; таким образом, уровень экспрессии данных каналов в исследованных интернейронах, видимо, существенно различен. Причиной неполного подавления М-тока, возможно, является участие в формировании этого тока других калиевых каналов (например, Kv1-семейства).

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*739.177.522

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж61875 Пошук видання у каталогах НБУВ