РА331075 Спиридонов, В. Г. НАН України. Ін-т біохімії ім. О.В.Палладіна. Рубрикатор НБУВ: Анотація: Досліджено молекулярні особливості взаємодії білка оболонки вірусу мозаїки люцерни (ВМЛ) з РНК4, яка кодує цей білок. У бактеріальній системі експресії одержано рекомбінантний білок оболонки ВМЛ. На підставі комп'ютерного аналізу амінокислотної послідовності виявлено, що даний білок має дві амінокислотні заміни ($Eroman {G sub 119 S} та $Eroman {Q sub 159 R}) та коротший за свій природний аналог на три амінокислотні залишки. Виділений та очищений рекомбінантний білок оболонки ВМЛ використано для імунізації кролів та одержання поліклональних антитіл. За допомогою вестерн-блот аналізу, з використанням афінно-очищених поліклональних антитіл, виявлено здатність рекомбінантного білка оболонки ВМЛ до стабільної димеризації за умов Iin vitroD. Встановлено негативний вплив мутації $Eroman {Q sub 159 R} у послідовності білка оболонки ВМЛ на формування гомодимерів у дріжджовій двогібридній системі Iin vivoD. За допомогою тригібридної системи вперше визначено, що білок оболонки ВМЛ з високою спорідненістю зв'язується з плюс-ланцюгом РНК4 за умов Iin vivoD. На підставі мутаційного аналізу функціональної частини білка оболонки ВМЛ виявлено, що N-термінальна частина білка оболонки ВМЛ (з 1 до 85 аз) містить РНК-зв'язувальний домен, здатний до активації експресії $Ebeta-галактозидази у тригібридній системі. З'ясовано, що C-термінальна частина білка оболонки ВМЛ (з 86 до 221 аз) не бере безпосередньої участі у взаємодії з РНК, однак активність $Ebeta-галактозидази у випадку взаємодії лише N-кінцевої частини нижча у п'ять разів на відміну від повнорозмірного білка, що може свідчити про те, !oprip481_H.pft: FILE NOT FOUND! Файл: 04svgssc.zip - 0Перейти: /ard/2004/ Видання зберігається у : |