Скачати повний текст

Розроблено методику культивування протопластів і регенерації рослин у люцерни, конюшини, гороху і у Oenothera hookeri. Протопласти сої, люпину, голубиного гороху при використанні розроблених методів культивування здатні до утворення клітинних колоній з високим ступенем ефективності. Отримано канаміцинстійкі рослини люцерни і клітинні лінії сої та гороху шляхом електропорації протопластів. Запропоновано метод, що підвищує ефективність трансформації у гороху та люцерни - "подвійна трансформація", що включає 1) отримання лінії рослин, які здатні до регенерації в культурі in vitro, за рахунок трансформації мутантом "shooty" A. tumefaciens pGV2206; 2) - трансформація ліній, які здатні до регенерації, селективним геном. Таким шляхом було отримано регенераційні лінії люцерни і гороху і далі трансгенні рослини гороху з Ds транспозоном кукурудзи та з геном стійкості до фосфінотрицину. Присутність генів в геномі рослин було доказано за допомогою методів полімеразної ланцюгової реакції, блот-гібридизації за Саузерном, NPT II аналізу, аналізу GUS активності, імуноферментного аналізу (ELISA). Міжвидові соматичні гібриди Medicago sativa_+ M.varia і M.borealis+ M.lupulina були отримані за допомогою асиметричної гібридизації. Хромосомний аналіз та блот-гібридизація рибосомальної ДНК підтвердили гібридну природу отриманих ліній. Було проведено гістологічний аналіз процесу регенерації у конюшини, гороху та цукрового буряка.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Розроблено методи отримання трансгенних рослин у родині хрестоцвітих, а також досліджено взаємодію перенесених генів у трансформованих лініях. Оптимізовано методику генетичної трансформації за допомогою агробактерії трьох сортів рапсу і трьох сортів білоголовкової капусти. Запропоновано методику прямого переносу генів у мезофільні протопласти цвітної капусти з наступною регенерацією трансгенних рослин. За допомогою полімеразної ланцюгової реакції, саузерн-, нозерн-, вестерн-гібридизацій встановлено наявність і експресію сторонніх генів у трансформованих рослинах. Апробовано метод одночасного переносу кількох генів у геном арабідопсису шляхом трансформації in planta.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Одержано та досліджено дві регуляторні послідовності, що забезпечують коренеспецифічну та світлозалежну експресію химерних генів у бактеріальних і рослинних клітинах. Промотор, що має коренеспецифічні властивості, одержано в результаті клонування фрагментів ядерної ДНК тютюну перед кодувальною послідовністю безпромоторного гена неоміцинфосфотрансферази -II (npt-II). Підібрано фрагменти, що ініціюють транскрипцію у бактеріальних клітинах. Промоторну послідовність гена малої субодиниці рибулозо-1,5-дифосфаткарбоксилази (rbcS-3A) одержано шляхом її ампліфікації за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. Одержані послідовності проклоновано у плазмідних векторах. Рекомбінантні плазміди, що містять ці фрагменти перед репортерними генами, введені в клітини тютюну. Регуляторну активність й органоспецифічність доведено за допомогою генів npt-II хлорамфеніколацетилтрансферази (cat). У сконструйовані вектори введено ген металотіонеїна. Показано підвищену здатність трансгенних рослин до акумуляції іонів важких металів у клітинах органів з експресією гена металотіонеїну, що вибірково індукується досліджуваними промоторами.

  Скачати повний текст

Встановлено, що фенотиповим проявом алеля clv1-1 є три-чотиригніздий плід, який розкривається трьома-чотирма стулками - коробочка. Виявлено плейотропний ефект дії рецесивного алеля ap1-1 на чашолистки, пелюстки, тичинки та плодолистки, який призводить до зменшення середніх значень даних органів. Встановлено відмінність в організації геному ліній арабідопсиса NW20, N28, N45 та Lug228. Одержано нові три-, пента- та гептамутантні рецесивні лінії.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Дисертація присвячена отриманню трансгенних рослин тютюну та картоплі з експресією химерних генів, що направляється клонованими органоспецифічними промоторами. Злиттям мезофільних протопластів з плазмідною ДНК отримані трансгенні рослини тютюну з коренеспецифічною експресією гену Inpt-ІІD, що направляється клонованим промотором IгрS12D. В трансгенних рослинах картоплі, регенерованих з мікробульбочкових дисків після співкультивування з IAgrobacteriumD, продемонстрована бульбоспецифічна експресія генів IcatD та IhEGFD, що направляється промотором гену пататину lambda pat 122 та коренеспецифічна експресія гену IHBsAgD під контролем I35SD промотору IВМККD.

  Скачати повний текст

Запропоновано новий ефективний підхід щодо одержання транспластомних рослин для видів, які мають низький трансформаційний і регенераційний потенціал. Вперше одержано трасформовані пластоми рослин Salpiglossis sinuata, Scopolia carniolica, Physochlaine officinalis. Здійснено генетичну трансформацію пластомів, що функціонують у клітинах іншого виду. Проведено соматичну гібридизацію між рослинами Lycium barbarum та транспластомними представниками NIcotianf tabacum.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст