Індекс рубрикатора НБУВ: Р413.51-29

Рубрики:

Хвороби печінки

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Известно, что метаболиты арахидоновой кислоты (АК) обладают широким спектром действия на пролиферацию и жизнеспособность клеток. Изучена роль липоксигеназного пути метаболизма АК в изменении жизнеспособности культивируемых гепатоцитов крыс с помощью общего блокатора липоксигеназ - нордигидрогуаяретовой кислоты (НДГК), а также блокатора 5-липоксигеназы (5-ЛО) - кофейной кислоты. Оба блокатора снижали выход цитозольного фермента аланинаминотрансферазы из гепатоцитов и увеличивали количество апоптических клеток через 4 и 24 часа после воздействия. Апоптозиндуцирующее действие НДГК было выражено в большей степени, чем кофейной кислоты. Полученные результаты свидетельствуют и о том, что липоксигеназный путь метаболизма арахидоновой кислоты, в частности 5-ЛО, является важным регулятором выживания и апоптоза гепатоцитов.

Изучено влияние экзогенных лейкотриенов <$E roman В sub 4> и <$E roman С sub 4>, а также блокаторов липоксигеназ на апоптоз и некроз гепатоцитов крыс в первичной культуре с помощью подсчета живых, некротических и апоптических гепатоцитов (прижизненно окрашенных красителями Хехст 33342 и пропидиум иодидом), а также с помощью электронной микроскопии. Показано, что общий блокатор липоксигеназ - нордигидрогуаяретовая кислота и блокатор 5-липоксигеназы - кофейная кислота (<$E 2~cdot~10 sup -5> моль/л) индуцировали апоптоз в культуре гепатоцитов через 4 и 24 ч. В то же время лейкотриены <$E roman В sub 4> и <$E roman С sub 4> (<$E 10 sup -8> моль/л) увеличивали количество некротических и не вызывали существенных изменений количества апоптических гепатоцитов в культуре. Лейкотриены <$E roman В sub 4> и <$E roman С sub 4>, примененные на фоне блокаторов липоксигеназ, оказывали пронекротическое действие и снижали апоптоз, индуцированный блокаторами. Полученные результаты свидетельствуют о том, что липоксигеназный путь метаболизма арахидоновой кислоты является важным регулятором жизнеспособности и апоптоза гепатоцитов. Увеличение при некоторых заболеваниях печени содержания продуктов липоксигеназ, в частности лейкотриенов, может смещать баланс апоптической и некротической гибели клеток в сторону последней.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*734.26 + Е60*725.323.19

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

В экспериментах на изолированных неонатальных кардиомиоцитах крысы показано, что при моделировании аноксии - реоксигенации наблюдаются различные типы клеточной гибели: незапрограммированная (онкоз) и запрограммированная (апоптоз и аутофагическая клеточная смерть). При окраске пропидиум йодидом и бис-бензимидом соотношение живых, некротических и апоптотических клеток при аноксии - реоксигенации составляло 77 %, 14 %, 9 % соответственно (в контроле - 86 %, 9,6 % и 4,4 %). Електронно-микроскопические исследования неонатальных кардиомиоцитов после аноксии - реоксигенации позволили выявить морфологические особенности каждого из видов клеточной смерти. Аутофагическая деструкция клеток подтверждались специфической флюоресценцией монодансилкадаверина в вакуолярных образованиях кардиомиоцитов. Полученные результаты впервые указывают на наличие аутофагической клеточной смерти неонатальных кардиомиоцитов при аноксии - реоксигенации и обуславливают необходимость исследования ее роли в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*734.26

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

При двух видах иммунного повреждения яичников у мышей (ксеногенными антиовариальными антителами и иммунизацией аллогенным яичником) установлено нарушение мейотического созревания ооцитов в культуре. Нарушение оогенеза сопровождалось гибелью фолликулярных клеток преимущественно по апоптотическому пути, однако при иммунизации аллогенным яичником активировался и некротический путь их гибели.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*550.38 + Р715.52-29

Рубрики:

Загальна зоологія

Хвороби яєчників

Шифр НБУВ: Ж26810 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Высокодисперсный кремнезем (ВДК), который является действующим веществом лечебного препарата силикса, обладает способностью сорбировать белок и применяется для выведения вредных веществ белкового происхождения. Для установления новых возможностей применения силикса изучено влияние ВДК на жизнеспособность культивированных клеток организма. Исследовано действие 0,0001, 0,001 и 0,01 %-й концентрации ВДК на первичную культуру гепатоцитов крыс в течение 4 и 24 ч. Количество живых, апоптотических и некротических клеток определяли по морфологическим признакам после двойного прижизненного окрашивания флуоресцентными ядерными красителями (Хехст 33342 и йодид пропидиума). Количество клеток, в которых развились процессы аутофагии, оценено с помощью флуоресцентного

маркера аутофаголизосом монодансилкадаверина. Установлено, что ВДК обладает выраженным дозозависимым действием на клеточную гибель: через 4 ч и, в большей мере, через 24 ч увеличивалось количество клеток с морфологическими признаками апоптоза. Наименьшая из исследованных концентраций ВДК существенно не влияла на количество живых клеток и даже способствовала уменьшению вторичного постапоптотического некроза. Наибольшая концентрация ВДК приводила к резкому угнетению жизнеспособности гепатоцитов, что проявлялось в увеличении количества погибших клеток с признаками как некроза, так и, в меньшей степени, апоптоза на фоне снижения количества клеток с признаками аутофагии.

Известно, что тромбоксаны (Tx) оказывают повреждающее действие на печень, но их влияние на клеточную смерть, в частности, на апоптоз и его морфологические проявления практически не изучено. Гибель гепатоцитов крыс в первичной культуре изучена методами прижизненной окраски ядерными красителями Хехст 33342 и пропидиум йодид, а также электронной микроскопии. Установлено, что экзогенный TxB2 в норме увеличивает количество гепатоцитов с ранними стадиями апоптоза (конденсированный хроматин, уменьшение размеров ядер и клеток). Не выявлено достоверных изменений числа клеток с морфологическими признаками, которые характеризуют поздние стадии апоптоза (фрагментированные ядра и распад на апоптотические тельца). TxB2 усиливал действие четыреххлористого углерода на апоптотическую гибель гепатоцитов и увеличивал конденсацию хроматина в них. При действии TxB2 на гепатоциты, поврежденные хенодезоксихолевой кислотой, которая является индуктором апоптоза, значительно увеличивалось количество клеток с конечной стадией апоптоза - фрагментацией ядер и клеток.

У мышей линии СВА вызывали иммунное повреждение яичников введением ксеногенных антиовариальных антител (I серия) и иммунизацией аллогенным яичником (II серия). Изучено мейотическое созревание ооцитов in vitro, а также пути гибели фолликулярных клеток, клеток тимуса и лимфоузлов (апоптоз и некроз). Установлено, что при обоих видах иммунного повреждения яичников нарушалось мейотическое созревание ооцитов как в метафазе I (растворение зародышевого пузырька), так и в метафазе II (формирование первого полярного тельца). В обеих сериях уменьшалось количество живых фолликулярных клеток за счет усиления их гибели путем апоптоза. Во второй серии увеличивалось также количество клеток, гибнущих некротическим путем. Инъекция донора оксида азота молсидомина (10 мг/кг), за 1 час до каждого введения антител или антигена, способствовала выживанию фолликулярных клеток, клеток тимуса и лимфоузлов за счет уменьшения их гибели по апоптотическому и некротическому пути, а также способствовала менее выраженному нарушению мейотического созревания ооцитов.

С целью изучения иммунных механизмов патологии печени исследованы мононуклеарные клетки, выделенные из печени, при двух видах ее иммунного повреждения у мышей: клеточного генеза - введение конканавалина А (КонА) и антительного генеза - введение противопеченочных антител (ППА, <$Egamma>-глобулиновой фракции сыворотки кроликов, иммунизированных тканью печени мышей). Установлено, что оба вида повреждения сопровождались активацией иммунных процессов в ткани печени, что проявлялось в усилении пролиферации мононуклеаров, оцениваемой с помощью моноклональных антител ИПО-38. При действии ППА, в отличие от КонА, активация иммунных процессов проявлялась также в повышении процента плазматических клеток и более дифференцированных малых лимфоцитов среди мононуклеаров печени. Вместе с тем при введении КонА наблюдалось более выраженное усиление апоптоза и некроза мононуклеаров печени. Это соотносилось с намного большей при действии КонА экспрессией Fas-рецептора клеточной гибели на мононуклеарах печени. Таким образом, показано, что соотношение процессов пролиферации и гибели мононуклеарных клеток печени в условиях ее повреждения Т-клеточного генеза сдвигается в сторону существенного усиления апоптотической и некротической клеточной гибели, в частности Fas-опосредованной, тогда как в условиях повреждения антителами в большей мере выражены процессы пролиферации и активации иммунокомпетентных клеток.

Після часткової гепатектомії (ЧГЕ) у клітинах Купфера спостережено короткочасне виражене зростання експресії гена ІФН<$E alpha>, а в гепатоцитах - підвищення рівня РНК протеїнкінази P (ПКР), за яким збільшується вміст ІФН<$E alpha>-РНК. Лапаротомія спричиняє в клітинах Купфера та гепатоцитах стрімке зниження концентрації ІФН<$E alpha>-РНК. Вміст мРНК ПКР після операції зменшується. Білок ПКР визначено в ядрах і цитоплазмі гепатоцитів в інтактній печінці та печінці після ЧГЕ і лапаротомії в усі досліджувані строки, окрім 6 год після ЧГЕ, коли він присутній у цитоплазмі та майже не виявляється у ядрі. Експресія досліджуваних генів у клітинах обох типів має виражений клітиноспецифічний характер і свідчить про активацію та інгібування системи ІФН<$E alpha> відповідно в процесі відновлення печінки після ЧГЕ і реакції гострої фази після лапаротомії.

В експерименті на мишах лінії СВА вивчено вплив інгібітора активації ядерного транскрипційного фактора кВ (NF-kB) куркуміну (речовини рослинного походження - Curcuma longa) на мейотичне дозрівання ооцитів і загибель фолікулярних клітин через апоптоз і некроз при імунному ушкодженні яєчників, викликаному імунізацією тварин антигеном алогенного яєчника. NF-kB відіграє ключову роль у регуляції транскрипції генів, які кодують прозапальні чинники (цитокіни, молекули адгезії, індуцибельні NO-синтазу та циклооксигеназу), а також регулює проліферацію і загибель клітин. Встановлено, що імунізація мишей посилювала загибель фолікулярних клітин через апоптоз і некроз, призводила до розвитку запальних процесів в організмі (за лейкограмою крові) і порушувала мейотичне дозрівання ооцитів у метафазі I і II. Інтрагастральне введення куркуміну ("Sigma", США) в дозі 2 мг на тварину 4 рази на тиждень протягом усього періоду імунізації призводило до зниження кількості фолікулярних клітин, що гинули через апоптоз і, особливо, некроз, до послаблення запальних процесів та до покращання оогенезу.

В динамике КонА-индуцированного гепатита изучена апоптотическая и некротическая гибель клеток, выделенных из тимуса и селезенки. Установлено, что в тимоцитах усиление апоптоза происходит раньше, чем возрастание некроза. В спленоцитах выявлено значительное усиление некроза в ранние сроки действия КонА без существенных изменений апоптоза. Ингибитор активации NF-kB андрографолид ослаблял как некротическую, так и апоптотическую гибель клеток тимуса и селезенки, вызванную КонА. Это свидетельствует об участии NF-kB в механизме усиления клеточной гибели в условиях КонА-индуцированного иммунного гепатита.

Зазначено, що полі(АДФ-рибозо)полімераза (ПАРП) - родина із 18 ферментів, знайдених практично у всіх еукаріотів. ПАРП-1, найбільш розповсюджена ізоформа, активується у разі розривів ДНК і здійснює посттрансляційну модифікацію білків. Фермент синтезує ланцюги полімеру АДФ-рибози та приєднує їх до гістонів, білків репарації ДНК, транскрипційних факторів тощо. Встановлено важливу роль ПАРП-1 у підтримці стабільності геному. За надмірної активації ферменту проявляється його патологічна роль. ПАРП-1 задіяна в ушкодження тканин і є ключовим медіатором клітинної загибелі за умов оксидативного стресу, ішемії й ушкодження ДНК. Участь ПАРП-1 у запаленні пов'язана як з посиленням некрозу, так і з активацією експресії прозапальних генів. Інгібування ПАРП виявляло значний протективний ефект при моделюванні патології серцево-судинної системи, запальних та аутоімунних захворювань. Інгібітори ПАРП також мають протипухлинну дію, вони підвищують чутливість ракових клітин до ДНК-ушкоджувальних агентів. ПАРП-1 видається перспективною терапевтичною мішенню.

Вивчено генотоксичний стрес та шляхи загибелі імунокомпетентних клітин (ІКК) (апоптоз і некроз) за моделювання системного імунокомппексного пошкодження за допомогою імунізації мишей лінії CBA бичачим сироватковим альбуміном (БСА). Імунофлюоресцентними дослідженнями імунізованих мишей встановлено фіксацію імунних комплексів у тканинах печінки, селезінки, нирок і аорти. Гістологічний аналіз цих органів показав ураження судинної системи і меншою мірою паренхіми. Встановлено, що у разі імунізації БСА індекс ДНК-комет збільшувався в 1,4 разу в клітинах лімфовузлів і в 1,5 разу у клітинах тимуса. Спостерігалося підвищення кількості клітин з максимальним пошкодженням ДНК в препаратах тимуса (у 3,4 разу) і лімфовузлів (в 3,3 разу), що свідчить про сильний генотоксичний стрес. Знижувалася кількість живих ІКК і збільшувалася їх загибель, у тому числі прозапальним і імуногенним некротичним шляхами. Показано, що генералізований імунокомплексний патологічний процес призводить до пошкодження ДНК і загибелі ІКК як центрального (тимуса), так і периферичних органів імунної системи (лімфовузлів, селезінки). Генотоксичний стрес ІКК і посилення їх загибелі некротичним шляхом можуть відігравати значну роль у розвитку імунокомплексних захворювань. Ці показники кількості лімфоцитів периферичної крові можуть бути перспективною тест-системою для оцінювання тяжкості аутоімунних та імунокомплексних захворювань і ефективності їх лікування.

Успешность внедрения проектов в сфере e-Governement предполагает наличие базовых условий, включая качественный доступ к Интернету, цифровые компетенции граждан, а также достаточную степень развития основных сервисов государственных услуг. На основе этих предпосылок разрабатывается факторная модель и концептуальный фреймворк для оценивания двухсторонней готовности (граждан и государственных или городских институтов) для внедрения e-Governement проектов.