Розроблено імпедіометричний ДНК-сенсор, здатний визначати однонуклеотидну заміну в межах 531-ого гена rpoB M. tuberculosis при 1 нМ концентрації досліджуваної ДНК-мішені. Створено біосенсор на основі спектроскопії поверхневого плазмонного резонансу (ППР) для детектування наявності гібридного гена bcr-abl, який може забезпечити високо селективне, швидке та надійне розпізнавання відповідних послідовностей ДНК-мішеней із межею детектування 20 нМ без використання молекулярних міток. Для покращення робочих характеристик цього сенсора вперше реалізовано концепцію термодискримінації повністю та частково комплементарних олігонуклеотидів за допомогою геносенсора ППР із терморегульованою коміркою. Реалізовано спосіб селективного підсилення сигналу ППР шляхом використання наночастинок золота, модифікованих комплементарними пробі олігонуклеотидами-лінкерами.

Хромосомные аномалии в клетках костного мезга оценивали в динамике терапии хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) ингибитором bcr-abl-тирозинкиназы (400 мг/м<^>2) у 34 детей и подростков. Появление дополнительных аномалий хромосом в клоне с транслокацией t(9;22) или за его пределами, в частности del(16)(q22), del(11)(q23), del(6) (q23), del(21)(q12), трисомия хромосомы 8, дополнительные околотетраплоидные клоны свидетельствуют о нечувствительности опухолевых клеток к данной терапии у детей и подростков.

Philadelphia chromosome is a result of chromosomal rearrangement that leads to the appearing of the hybrid gene bcr/abl. A hybrid mRNA transcribes from bcr-promoter and many copies of hybrid molecules of Bcr/Abl protein are formed as a result of bcr/abl gene expression. It is supposed that a hybrid Abl molecule, replacing the normal one, in majority of cases functions abnormally or does not function at all. Also it is possible that Abl moiety of Bcr/Abl protein which is possibly recognized by some hypothetical cell control system interpreted by cell as an overproduction of c-abl. This, probably, leads to blocking the normal C-Abl molecules production from the normal c-abl gene transcribed from the second non-aberrant chromosome 9. Based on C-Abl physiological functions in conjunction with the most important proteins of which functions directly depend on its activity we tried to outline the research directions that might explain disruptions of the processes at chronic myeloleukosis such as cell migration due to CXCL12/CXCR4 axis activation, reparation, apoptosis, control for mitochondria state, and to propose new perspective therapeutic approaches based on all this knowledge.

The state-of-the-art technologies of diagnosing acute leukemias based on the novel WHO classification have been developed. The major forms and cytological variants of hematoblastoses have been diagnosed precisely in 755 patients in Ukraine with one third of them suffering from acute leukemias (AL). The primers for detecting the transcripts of chimerical genes bcr/abl (t(9;22)(q34;q11)); mll/af4 (t(4;11) (q21;q23)); mll/af9 (t(9;11)(p22;q23)) in reverse transcrip tase polymerase chain reaction (RT-PCR) have been desig ned. RT-PCR has been used for differential diagnostics in AL patients.

Доповнено уявлення про механізми розвитку хронічної мієлоїдної лейкемії (ХМЛ). Розкрито важливу роль у цьому процесі доменів Bcr. Вперше показано, що у хворих на гостру лімфобластну лейкемію (ГЛЛ) та ХМЛ з р210 bcr-abl мРНК на гострій стадії захворювання відбувається втрата різних за протяжністю ділянок DH домену. На основі аналізу потенційної білкової послідовності, яка відповідає виявленим варіантам, обгрунтовано їх можливу функціональну подібність із білками p190^Bcr-Abl. Вперше запропоновано новий підхід до визначення та диференційної діагностики Ph'-позитивних лейкемій, який дозволяє виявляти як класичні, так і можливі нові типи перебудов у ділянці bcr химерного гена bcr-abl. Виявлено взаємозв'язок між мутаціями у DH ділянці гена bcr-abl і організацією актинового цитоскелета в поліморфноядерних лейкоцитах хворих на ХМЛ на стадії бластного кризу. Досліджено GEF-активності ізольованого DH домену Bcr методом "pull-down" аналізу. Ідентифіковано 23 білки, що взаємодіють з РН доменом Вcr. Показано вплив РН домену на субклітинну локалізацію білка Bcr-Abl.

У некоторых больных лейкемией с наличием <$E roman Ph prime>-хромосомы обнаружены делеции в dbl домене гибридного гена <$E bcr "/" abl>. Обсуждено возможное влияние подобных изменений на особенности течения заболевания.

Bcr/abl гібридний ген є невід'ємною характеристикою хронічної мієлоїдної лейкемії (ХМЛ) і значної кількості випадків гострого лімфобластного лейкозу (ГЛЛ). Саме експресія цього гена обумовлює початок чи один з етапів розвитку цих захворювань. На молекулярному рівні ХМЛ відрізняє від ГЛЛ наявність додаткових 3 - 10 екзонів (відповідно Dbl, PH домени) bcr частини гібридного гена/білка. За допомогою секвенування продуктів полімеразної ланцюгової реакції цієї області проаналізовано появу в ній мутацій під час бластної кризи, грунтуючись на функції згаданого домену, вивчено розподіл актину в цей період. Встановлено наявність мутації в положенні 2109 bcr/abl мРНК (транзиція T на C), що призводить до заміни Phe547 на LeU547. Флуоресцентна мікроскопія клітин еритробластної кризи ХМЛ за допомогою FITC-фалоїдину свідчить про парамембранну локалізацію актину.