В тканях сосудистой стенки в условиях сахарного диабета (СД) протеинкиназа C (ПКС) вызывает активацию НАДФH-оксидазы (НОК), что приводит к усилению образования реактивных форм кислорода (РФК). Путь активации НОК при этом включает p66<^>Shc- и Rac1-опосредованное фосфорилирование субъединиц НОК p47<^>phox, p67<^>phox и gp91<^>phox. Таким образом, ПКС, будучи активирована РФК, сама является активатором их образования в сосудистой стенке при СД. Гипергликемия также приводит к образованию конечных продуктов гликации, которые связываясь со специфическими рецепторами, вызывают активацию ПКС в сосудистой стенке непосредственно или путем активации сосудистого эндотелиального фактора роста (СЭФР). С другой стороны, активация ПКС может быть вызвана усилением de novo синтеза диацилглицерола (ДАГ), поддержанного активацией диацилглицеролкиназы, или следствием повышения активности фосфолипазы C-<$Egamma sub 1> в результате активации полиольного пути. Также повышению концентрации ДАГ в сосудистых тканях при диабете может содействовать увеличение синтеза СЭФР.

Отмечено, что CD150 - клеточный поверхностный рецептор, принадлежащий к подсемейству CD2 суперсемейства иммуноглобулинов. Функции CD150 связаны с наличием двойного мотива TxYxxV/I в цитоплазматической части CD150. Этот мотив может связывать разные молекулы, которые принимают участие в передаче сигналов и содержат SH2 домен, а именно, тирозин и инозитол фосфатазы, киназы семейства Src, а также адапторные молекулы SH2D1A и EAT-2. С целью изучения сигнальных путей, которые инициируются CD150 и регулируются адапторным белком SH2D1A, использованы B-клеточные линии цыпленка DT40CD150<^>+ и DT40CD150<^>+SH2D1A<^>+. Лигация CD150 на поверхности этих клеток приводила к инициации Ras пути (активация ERK1/2) и не влияла на Rac-опосредованный сигнальный путь (JNK1/2 и р38 MAPK). Трансфекция адапторного белка SH2D1A в клетки DT40, которые экспрессируют CD150 приводит к BCR-инициируемому увеличению фосфорилирования внутриклеточных субстратов тирозина и мобилизации Ca<^>2+; фосфорилированию по тирозину белка весом 52 - 55 кДа в ответ на лигацию CD150; CD150-опосредованной активации Akt/PKB. Эти данные имеют большое значение для понимания молекулярных основ регуляции путей передачи сигналов через рецептор с мотивом TxYxxV/I в нормальных и злокачественно трансформированных лимфоцитах, так как SH2D1A является продуктом гена, мутированного при лимфопролиферативном заболевании сцепленным с X хромосомой, B-клеточных неходжкинских лимфомах и семейном гемофагоцитарном лимфогистиоцитозе.

Зазначено, що білок Dbl і домени DH (Dbl homology) є важливими регуляторами GTP-аз родини Rho, які полегшують вивільнення GDP із комплексу з GTP-азою. Відомо близько 70 білків, що містять домени DH, які досить часто знаходяться в тандемі з доменами PH (pleckstrin homology). Серед них білок Bcr, який є партнером Abl у реципрокній транслокації t(9;22), що призводить до утворення філадельфійської хромосоми. Клоновано ділянки DH і PH гена bcr у вектор для експресії у клітинах еукаріотів. Перевірено GEF-активність домену DH окремо і разом із доменом PH. Показано, що in vivo домен DH білка Bcr не має GEF-активності щодо підкласів RhoA, Cdc42 і Rac1 GTP-аз родини Rho.

Досліджено особливості структури DH і PH доменів білка Bcr та встановлено їх функціональну активність. За цього клоновано ділянки гена bcr, що відповідають DH і PH доменам, а також тандему DHPH білка Bcr і одержано рекомбінантні білки DH, PH і DHPH. Уперше проведено дослідження GEF-активностї DH домену Bcr окремо і разом з РH доменом за методом "pull down"-аналізу. Показано відсутність його GEF-активності щодо Rho-ГТФаз підкласів RhoA, Cdc42 і Rac1 in vitro та in vivo. Визначено ліпіди, що зв'язують з PH доменом Bcr з високою активністю. З використанням методів "pull down", двовимірного електрофорезу і мас-спектрометрії уперше показано взаємодію PH домену Bcr з білками, доведено зв'язування з білками SMC, <$Ebeta>-тубулін, зизимін 1, PLC<$Eepsilon>. Показано вплив PH домену на субклітинну локалізацію білка Bcr-Abl.

  Скачати повний текст

Індекс рубрикатора НБУВ: Р411.022

Рубрики:

Лейкози(лейкемії)

Шифр НБУВ: РА356680 Пошук видання у каталогах НБУВ 

The molecular genetic polymorphism detection systems to screen the presence of alleles in winter wheat 100 varieties were developed. Polymerase chain reactions were deployed to identify relevant genes. The level of allele prevalence of low and medium activity of polyphenol oxidase enzymes was defined and the validation was carried out. Wheat varieties carrying rye 1AL.1RS, 1BL.1RS translocations were characterized and those containing recessive allele of Tamyb10 gene, with Stb4 gene resistance to Septoria linked to polymorphic locus Xgwm111. Waxy wheat variety was discovered and other varieties carrying atypical functional Wx-B1e allele. Characteristics of 100 elite and perspective varieties of wheat were compiled for the presence of alleles of genes determining grain quality (genes PPO, Tamyb10- A1, Wx), resistance to biotic and abiotic stress (rye translocative material, Tamyb10-A1, Stb4).