Досліджено дію бджолиної отрути на еритроцити, дегідратовані у різних середовищах при 37 і 0 °C. Виявлено збільшення стиснення клітин порівняно з початковим об'ємом при підвищенні осмолярності середовищ дегідратації як при 0, так і при 37 °C. Швидкість гемолізу підвищувалась у 2 - 3 рази за одним виключенням: клітини, дегідратовані у гіпертонічних розчинах KCl при 0 °C, мали таку ж чутливість до гемолізу, індукованого бджолиною отрутою, як і контрольні клітини.

Установлено, что чувствительность эритроцитов к постгипертоническому лизису (ПГЛ) зависит от состава среды дегидратации, продолжительности гипертонической инкубации и температуры среды регидратации. Ингибитор анионного транспорта DIDS оказывает выраженное защитное влияние на эритроциты в условиях ПГЛ, если среда дегидратации содержит неэлектролит. При дегидратации в электролитной среде (1,2 моль/л NaCl) защитное влияние DIDS выражено слабее и зависит от температуры среды регидратации. Предполагается, что фактором, контролирующим чувствительность эритроцитов к ПГЛ, является скорость объемных изменений эритроцитов на обоих этапах инкубации.

Установлено, что частичная потеря клеткой <$E roman K sup +> в результате гипертонической инкубации в 0,8 - 1,4 М растворе сахарозы способствует увеличению осмотической устойчивости эритроцитов к гипотоническому шоку (50 мМ раствор NaCl). Чувствительность клеток к изменению осмотических параметров среды после дегидратации в растворах неэлектролитов, содержащих валиномицин (конечная концентрация 1мМ), зависит от температуры гипертонической инкубации.

Исследовано влияние n-бутанола и n-гексанола на анионный транспорт в эритроцитах человека, барана и курицы. Анионный транспорт измерян опосредованно путем регистрации изменения pH внеклеточной среды. Известно, что изменение pH происходит в результате <$E roman {Cl sup - "/" HSO} sub 4 sup -> обмена при помощи анионного обменника - белка полосы (БП) 3. Вычислена константа скорости входа ионов водорода (КСВИВ) K2. Как n-бутанол, так и n-гексанол уменьшают КСВИВ в эритроцитах всех исследуемых видов, что свидетельствует о замедлении <$E roman HSO sub 4 sup -> транспорта в клетку в присутствии n-алканолов. Таким образом, можно предположить, что как n-бутанол, так и n-гексанол взаимодействуют с БП 3 в эритроцитах, изменяя его функциональное состояние.

Індекс рубрикатора НБУВ: Р454.999

Рубрики:

Пластика інших тканин

Шифр НБУВ: Ж14260 Пошук видання у каталогах НБУВ 
Повний текст  Наукова періодика України 

Исследованы основные биофизические параметры фолликулярной жидкости человека до и после действия низких температур. Показано незначительное влияние криоконсервирования на осмотическое давление, pH, плотность фолликулярной жидкости и увеличение динамической вязкости криоконсервированной фолликулярной жидкости приблизительно на 40 %.

Показано, что истощение эритроцитов человека и животных по АТФ приводит к изменению их чувствительности к гипер- и гипотоническому шоку, при этом реакция клеток не зависит от вида стрессового воздействия. В условиях гипо- и гипертонического шока уровень гемолитического повреждения эритроцитов человека снижается, а животных - повышается.

Исследовано влияние додецил-<$Ebeta>,D-мальтозида (ДМ) и трифторперазина (ТФП) на чувствительность эритроцитов млекопитающих (человек, бык, лошадь, кролик) к гипертоническому стрессу (ГС) (4,0 моль/л NaCl). Показано, что использование амфифильных соединений в определенных концентрациях приводит к повышению устойчивости к ГС эритроцитов человека, быка, лошади, но не кролика. Защитное действие амфифильных соединений выше при температуре <$E37~symbol Р roman C>, чем при <$E0~symbol Р roman C>. Катионный ТФП более эффективен, чем неионный ДМ. Установлено, что исследуемые вещества не влияют на выход катионов калия из клеток в условиях ГС. Сделано предположение, что защитный эффект ТФП и ДМ связан с их пертурбирующим действием на мембрану и предотвращением развития трансмембранных дефектов до размера гемолитических пор.

Исследована чувствительность эритроцитов человека, быка, крысы и лошади к действию механического стресса в средах, содержащих 0,15, 0,4 и 0,6 моль/л NaCl. Механический стресс эритроцитов млекопитающих в среде, содержащей 0,15 моль/л NaCl, приводит к потере клетками K<^>+ от 30 % для эритроцитов лошади, до 60 % для клеток быка. Максимальную устойчивость по показателю гемолиза к действию механического стресса проявляют эритроциты быка и лошади в среде, содержащей 0,15 моль/л NaCl. Показано, что обезвоживание эритроцитов человека, быка, крысы и лошади в средах 0,4 и 0,6 моль/л NaCl повышает чувствительность клеток к механическому стрессу. Наиболее чувствительны к увеличению осмотической нагрузки в условиях механического стресса по показателю гемолитического повреждения эритроциты быка и крысы, а по показателю выхода ионов калия - клетки лошади. Сделано предположение, что разная чувствительность эритроцитов млекопитающих к механическому стрессу в условиях осмотической нагрузки определяется видовыми особенностями транспорта воды и липидного состава эритроцитарных мембран. Сравнительный анализ влияния обезвоживания эритроцитов на их устойчивость к стрессовым факторам показал, что формирование стабильного состояния клеток (в среде, содержащей 0,4 моль/л NaCl) к действию гипертонического шока не обеспечивает их устойчивость в условиях механического стресса.

Исследовано влияние глюкозы (5 %) на чувствительность эритроцитов млекопитающих (человека, крысы, кролика) к механическому стрессу. Показано, что наиболее чувствительны к обработке глюкозой эритроциты человека, для которых характерно наличие повреждения после инкубации с глюкозой даже без воздействия механического стресса. В то же время предварительная обработка глюкозой эритроцитов кролика не оказывает влияния на чувствительность клеток к механическому стрессу. Предполагается, что различная чувствительность к обработке глюкозой эритроцитов исследуемых млекопитающих обусловлена особенностями транспортных характеристик их мембран по отношению к этому метаболиту.

Цель работы - оценить результаты клинического исследования эффективности вспомогательного хетчинга криоконсервированных эмбрионов. Для участия в исследовании отобраны пациенты, у которых были неудачные циклы IVF/ICSI в 2014 - 2016 гг. с переносом свежих эмбрионов. Пациентов случайным образом поделили на группы эксперимента и контроля. Учитывали результаты эмбриотрансфера одного или двух замороженных-оттаянных эмбрионов. Эмбрионы были криоконсервированы на стадии бластоциты, через 5 дней после извлечения ооцитов с помощью метода витрификации. Процедуру оттаивания проводили утром в день эмбриотрансфера по инструкциям производителя сред для витрификации Cryotech (Япония). Вспомогательный хетчинг проводили при помощи микропипеток Holding Pipette Cook Medical (Австралия) и Assisted Hatching/Zona Drilling Pipette Cook Medical (Австралия). Обработанные эмбрионы культивировали до повторной оценки морфологии перед переносом. Перенос эмбрионов проводили стандартным методом при помощи катетера для атравматичного переноса эмбриона Sydney IVF Cook Medical (Австралия). Количество перенесенных эмбрионов - 1 или 2. Проведено 100 переносов криоконсервированных эмбрионов, которые были случайным образом отнесены либо в группу со вспомогательным хетчингом, либо в контрольную группу без такого. Проанализировали ряд параметров пациентов обеих групп: возраст на момент оттаивания эмбрионов, продолжительность, причины бесплодия, количество предыдущих неудачных циклов IVF/ICSI. Никаких существенных различий у пациентов по данным параметрам не обнаружили. Также не отметили существенных различий по количеству размороженных эмбрионов, выживаемости эмбрионов, количеству эмбрионов, перенесенных пациенткам. Вместе с тем показатели положительных результатов тестов на ХГЧ (42 % против 27 %) и количество клинических беременностей (35 % против 24 %) были достоверно выше в группе со вспомогательным хетчингом, по сравнению с контрольной группой (р << 0,004, р << 0,001 соответственно). Выводы: анализируя данные научной литературы и проведенных исследований можно сделать вывод, что при подборе оптимальных условий замораживания, последующего культивирования и профессионального проведения процедуры механического надсечения зоны пеллюцида достоверно улучшаются показатели имплантации перенесенных эмбрионов и число клинических беременностей.