Дано огляд наукової літератури про застосування сучасних методів діагностики ВІЛ-інфекції в лабораторній практиці. Описано методи виявлення антигену і специфічних антитіл у біологічних рідинах. Наведено основні принципи методів діагностики ВІЛ-інфекції, проаналізовано їх специфічність, чутливість, переваги та недоліки. Розглянуто основні напрямки удосконалення даних методів - автоматизація й експресність тестів поряд з підвищенням їх чутливості та специфічності.

Одержано оригінальний набір з 17-ти клонів гібридом-продуцентів моноклональних антитіл до Fc-фрагментів IgG людини. Порівняльно вивчено можливість використання пероксидазних кон'югантів одержаних моноклональних антитіл у складі імуноферментних тест-систем компанії "ДіаПрофМед" для діагностики сифілісу, краснухи, токсоплазмозу та цитомегаловірусної інфекції. Доведено, що застосування пероксидазних кон'югантів двох моноклональних антитіл (156С10 і 153H11) у складі п'яти діагностичних наборів забезпечує високі показники специфічності й чутливості.

Одержано набір гібридом-продуцентів моноклональних антитіл (МКАТ) до імуноглобулінів людини класу G. Відібрано три найбільш активних і специфічних клони (156D11, 153H11 і 156C10), що є придатними для використання в імуноферментних тест-системах. Вивчено можливість застосування пероксидазних кон'югатів даних МКАТ у складі діагностичного набору DIA-HSV 1/2-IgG для визначення антитіл класу IgG до вірусу простого герпесу I і II типів.

Розроблено науково-методичні засади для отримання біологічних компонентів і конструювання на їх основі високоінформативної імуноферментної тест-системи для діагностики ВІЛ-інфекції. Антигенами в дослідженнях були рекомбінантні білки ВІЛ-1: Env1, Gag1, Gag120 та ВІЛ-2: Env2. З використанням імуноферментних кон'югатів (проти імуноглобулінів людини) поліклональних антитіл з пероксидазою хрону (ПХ) та з біотином, афіноочищених антивидових імуноглобулінів із ПХ, рекомбінантного білка A S. aureus та стрептавідину з ПХ, моноклональних антитіл проти IgG людини з ПХ було сконструйовано імуноферментні системи другого покоління. Вперше отримано стабільні препарати пероксидазних кон'югатів з рекомбінантними антигенами ВІЛ-1 та ВІЛ-2 та створено на їх основі імуноферментну тест-систему третього покоління для виявлення ВІЛ-специфічних антитіл. Порівняльний аналіз розроблених ТІФА систем другого та третього поколінь на зразках крові ВІЛ-інфікованих громадян України, стандартних панелях анти-ВІЛ-1/2 позитивних і негативних сироваток на масиві ВІЛ-1/2 негативних зразків показав, що найбільш високою чутливістю та специфічністю характеризувалась імуноферментна система третього покоління з використанням пероксидазних кон'югатів рекомбінантних антигенів ВІЛ. На базі цього варіанта розроблено тест-набір - ІФА-ВІЛ-1/2-III, детально проаналізовано його показники інформативності (чутливість, специфічність) і стабільність.

The level of antibodies against the clumping factor (Clf) of Staphylococcus aureus in healthy (3 % serum samples) children (aged from 8 to 16 years) and in those with staphylococcal infection (antritis) (26 samples) was studied by immunoenzyme assay (ELISA). Antibody levels against Clf in healthy donors (aged from 20 to 50 years) were also tested. The study revealed that serum of 100 % patients contains anti-Clf-antibodies. The antibody levels in healthy children differ from the levels in children with staphylococcal infection. No correlation of age and anti-Clf-antibody levels was found in healthy individuals. The possibility of utilization of the given antigen to the diagnostics of staphylococcal infection was demonstrated.

Індекс рубрикатора НБУВ: Р.с05

Рубрики:

Медична апаратура та інструментарій

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ