З використанням кальцієчутливого флуоресцентного зонда фура-2/АМ та металохромного барвника арсеназо III виміряно внутрішньоклітинну концентрацію іонів кальцію (<$E[ roman Са sup 2+ ] sub i>) та вміст загального кальцію в ізольованих ацинарних клітинах підщелепної слинної залози щурів. Установлено, що під впливом меркаптидформувальної сполуки парахлормеркурійбензоату натрію (ПХМБ) збільшувались <$E[ roman Са sup 2+ ] sub i> та вміст загального кальцію, проте не відбувалося змін рівня екзоцитозу. Така ситуація, ймовірно, пов'язана з тим, що ПХМБ інгібує <$E roman Са sup 2+>-АТФазу плазмалеми (РМСА). Відсутність змін екзоцитарної активності можна пояснити тим, що істотне збільшення <$E[ roman Са sup 2+ ] sub i>, обумовлене ПХМБ, нівелюється за рахунок роботи <$E roman Са sup 2+>-АТФаз ендоплазматичного ретикулума (SERCA), які закачують <$E roman Са sup 2+> в депо. Інкубація фракції мікросом з ПХМБ призводила до пригнічення питомих активностей РМСА та SERCA з удаваними константами інгібування (<$E I sub 50>) 245 та 52 мкМ відповідно. Дитіотреїтол (ДТТ, 0,1 мМ) збільшував активність РМСА та SERCA (можливо, полегшуючи доступ субстрату до активних центрів АТФаз за рахунок зменшення кількості дисульфідних зв'язків і наступної зміни конформації внутрішньоклітинних гідрофільних петель їх молекул). ДТТ також відновлював обумовлене преінкубацією з ПХМБ пригнічення активності РМСА та SERCA, проте рівень їх активності не досягав початкових значень (на 45 та 32 % відповідно). Можливо, це пояснюється тим, що ДТТ екранує від дії ПХМБ тільки поверхневі, а не стерично менш доступні SH-групи. Внаслідок обмеженог

о протеолізу мікросом <$E alpha>-хімотрипсином питомі активності РМСА та SERCA зменшувалися на 16 та 60 % відповідно. Інкубація мікросом у середовищі з <$Ealpha>-хімотрипсином (15 с) з наступним додаванням 150 мкМ ПХМБ майже не спричиняла змін активності РМСА, тоді як активність SERCA різко збільшувалася (на 146 %). Цей факт дозволяє зробити припущення про те, що <$Ealpha>-хімотрипсин виявляє здатність елімінувати інгібіторний вплив ПХМБ на активність SERCA; механізм подібного ефекту залишається невідомим. Отже, у каталітичних та активаційних центрах РМСА та SERCA присутні функціонально важливі SH-групи, причому в молекулі РМСА переважають поверхневі SH-групи, a SERCA регулюється більш глибоко розташованими SH-групами.

• Войтенко Нана Володимирівна (1968–) (біологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"