Экспрессирована рекомбинантная S6K2 в бакуловирусной системе. Выделены препаративные количества гомогенного белка для биохимических исследований. Получены и охарактеризованы специфические моноклональные антитела против рекомбинантной S6K2. Изучены экспрессия и внутриклеточная локализация S6K1 и K2 в злокачественных и доброкачественных опухолях молочной железы по сравнению с аналогичными нормальными тканями. Рекомбинантный бакуловирусный вектор, экспрессирующий S6K2 дикого типа, создан с помощью Bac-to-Bac системы (Invitrogen); рекомбинантная S6K2 очищена из инфицированных Sf9 клеток с помощью метода афинной хроматографии. Получены моноклональные антитела против рекомбинантной S6K2. Специфичность полученных антител в реакции с рекомбинантной и эндогенной S6K2 изучена с помощью методов ELISA, Вестерн-блоттинга, иммунопреципитации и иммуногистохимического окрашивания. Для иммуногистохимического определения S6K1 и S6K2 в нормальных и опухолевых тканях молочной железы использовали моноклональные антитела против S6K1 и К2. Препаративные количества ферментативно активной S6K2 получали с использованием бакуловирусной экспрессирующей системы. Для получения и характеристики моноклональных антител применяли высокогомогенные препараты S6K2. В опухолях молочной железы выявлен повышенный уровень экспрессии S6K1 и S6K2 по сравнению с таковым в аналогичных нормальных тканях. S6K2 часто локализовалась в ядрах аденокарцином, но редко в фиброаденомах и нормальных тканях молочной железы. Сделан вывод, что получение препаративных количеств рекомбинантной S6K2 и

создание специфических моноклональных антител к S6K2 - эффективный способ изучения функции и регуляции этой важной сигнальной молекулы в нормальных и опухолевых клетках. Иммуногистохимический анализ экспрессии S6K1 и K2 в нормальных тканях и злокачественных опухолях молочной железы подтверждает их повышенную экспрессию в последних. Накопление S6K2 в ядрах раковых клеток может быть связано с нарушением ядерно-цитоплазматических перемещений, а следовательно, может нарушать клеточный рост и пролиферацию.

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"