Цель работы: идентификация новых белков-партнёров TSC2. В работе использована DupLEX-A<191> двугибридная система дрожжей, разработанная OriGene Technologies. Сконструированные "байт"-конструкты, содержащие полноразмерную форму и С-концевой участок TSC2, проверены в тестах на экспрессию, проникновение в ядро и самоактивацию с использованием стандартного протокола DupLEX-A<191> системы. Выполнен двугибридный скрининг кДНК библиотек клеток HeLa и эмбриона мыши с последующим отбором позитивных клонов методом полового слияния. Последовательности отобранных клонов идентифицированы с помощью сиквенс-анализа и поиска гомологии в базах данных. Скрининг кДНК библиотек с помощью полноразмерной формы TSC2 и его С-концевого домена позволили отобрать 102 положительных клона. Для 82-х клонов методом полового слияния было подтверждено наличие взаимодействия. В результате проведенного анализа последовательностей были идентифицированы уже известные, а также новые белки-партнёры TSC2. С помощью дрожжевой двугибридной системы были найдены новые партнеры TSC2, представленные белками цитоскелета, различными сигнальными молекулами, а также белками, регулирующими клеточную адгезию. Также было показано наличие взаимодействия между TSC2 и некоторыми изоформами белков семейства 14-3-3, что в свою очередь подтверждает достоверность обнаруженных взаимодействий TSC2 с вышеуказаными белками.

• Філоненко Валерій Вікторович (1963–) (біологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"