Мацелюх А. Б. Трансформація протопластів Streptomyces globisporus 1912 за допомогою векторів, сконструйованих на основі ендогенної плазміди : Автореф. дис... канд. біол. наук : 03.00.07 / А. Б. Мацелюх; НАН України. Ін-т мікробіології і вірусології ім. Д.К.Заболотного. - К., 2003. - 20 c. - укp.Створено трансформаційну систему вектор - господар для Streptomyces globisporus 1912 - продуцента нового протиракового антибіотика "Ландоміцину Е". У ролі реципієнтів використано протопласти похідних мутантів штама дикого типу 1912, які відрізняються між собою ознаками утворення повітряного міцелію, синтезу ландоміцину Е та вмістом плазмідної ДНК. В усіх досліджених штамах виявлено систему рестрикції чужорідної ДНК, яка значно знижує частоту генетичної трансформації протопластів за допомогою стрептоміцетних векторів pIJ487, pWHM4 і pGM160. Запропоновано два підходи для подолання рестрикційного бар'єру: використання модифікованої ДНК векторів, виділеної з первинних трансформантів; створення векторів на основі ендогенної плазміди S. globisporus 1912. Показано, що вихідний штам 1912 та його спонтанний варіант 3-2 стабільно успадковують дві плазміди - pSG1912-1 (10,3 т.п.н.) і pSG1912-2 (22 т.п.н.), мутантні штами 3-1, А1, Б1, Б2 - меншу плазміду, а штами А2 і RS1 втратили обидві плазміди. За допомогою рестрикційного аналізу визначено їх розміри та наявність унікальних сайтів рестрикції. На основі плазміди pSG1912-1 сконструйовано векторні молекули pSG1912-3 (8,9 т.п.н.) і pSG1912-4 (8 т.п.н.) шляхом клонування гену резистентності до тіострептону як селективного маркера. За цього частота генетичної трансформації протопластів безплазмоїдного та антибіотиконеактивного штаму А2 за допомогою сконструйованих векторів становила <$E10 sup 4> на 1 мкг ДНК. Показано можливість використання ДНК pSG1912-4 для клонування фрагмента хромосомної ДНК Індекс рубрикатора НБУВ: Е422.384.3*440.44
Рубрики:
Шифр НБУВ: РА327489 Пошук видання у каталогах НБУВ Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|