Цель работы - клонировать ген SPAA - поверхностный антиген Er. rhusiopathiae - в плазмидный вектор и экспрессироватъ белок SpaA в E. coli. Методы - расчет и синтез олигонуклеотидных праймеров, полимеразная цепная реакция, тонирование, экспрессия рекомбинантных белков в E. coli, электрофорез в агарозе и полиакриламидном геле. Полноразмерный и усеченный ген SPAA Er. rhusiopathiae клонирован в экспрессирующую плазмиду pET24a(+). Экспрессия полного гена не сопровождается наработкой значительного количества рекомбинантного белка, предположительно, вследствие его токсичности для клеток E. coli. Элиминация из полноразмерного гена фрагмента, кодирующего насыщенную пролином область, и домена тандемных повторов, а также получение усеченного варианта гена приводят к устойчивому синтезу рекомбинантного продукта с ожидаемой молекулярной массой. Получена рекомбинантная плазмида, содержащая фрагмент гена SPAA Er. rhusiopathiae, что позволяет выделять в препаративних количествах в E. coli рекомбинантный белок с м. м. 47 кДа.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*440.44 + Е0*443.1

Рубрики:

Загальна біологія

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

---

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"