Коршун Л. Н. Оптимизация условий получения очищенной субстанции рекомбинантного альфа-2b интерферона человека из фракции растворимого протеина, экспрессируемого в бактериях Escherichia coli / Л. Н. Коршун, И. В. Орловская, Л. Н. Мойса, М. И. Вудмаска, А. И. Мельник, А. Ю. Горлов, С. В. Михалап, Н. Я. Спивак // Біотехнологія. - 2012. - 5, № 1. - С. 62-69. - Библиогр.: 23 назв. - рус.Полученные к настоящему времени данные свидетельствуют о важной контрольно-регуляторной функции интерферонов в сохранении гомеостаза, о наличии прямых и обратных связей между интерферонами, иммунной и нейроэндокринной системами, которые в совокупности составляют основу биологической защиты организма. Применение интерферона в терапии ряда заболеваний базируется главным образом на его антивирусных, антипролиферативных, иммуномодулирующих и радиопротекторных свойствах. Однако широкое внедрение этих препаратов, получаемых из лейкоцитов периферической крови доноров, ограничивается их высокой стоимостью и дефицитом биологически безопасного сырья. Важным достижением в области изучения биологических свойств лейкоцитарного интерферона человека было определение его аминокислотной последовательности, что с помощью ДНК-технологий позволило получить первые искуcственные аналоги, пригодные для применения в клинической практике. В современном биотехнологическом производстве рекомбинантных протеинов используют клетки различных микроорганизмов. Цель работы - подбор оптимальных условий индукции биосинтеза растворимой формы альфа-2b интерферона человека в клетках бактерий Escherichia coli и разработка эффективной технологии получения очищенной субстанции, пригодной для изготовления препаратов интерферона терапевтического назначения. В ходе исследований применен плазмидный вектор рЕТ32а, содержащий вставку гена, продуктом экспрессии которого в клетках E. coli штамма Origami(DE3) был рекомбинантный аналог природного лейкоцитарного альфа-2b интерферона человека. Подобраны оптимальные параметры культивирования продуцента для максимального выхода растворимой формы заданного протеина. Разработана трехступенчатая схема хроматографической очистки альфа-2b интерферона, включающая катионо- и анионообменную хроматографию с применением сорбентов: CM-toyopearl и DEAE-toyopearl, а также гель-фильтрацию. При этом степень очистки полученной субстанции альфа-2b интерферона составляла 96 - 98 %, а выход протеина - 2,31 мг в расчете на 1 л питательной среды. Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*725.311.3*723.11
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж100178 Пошук видання у каталогах НБУВ
Повний текст Наукова періодика України Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) ![](/irbis_nbuv/images/info.png) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|