Колодзейская М. В. Связывание ингибитора Кунитца - Нортропа на некоторых сорбентах / М. В. Колодзейская // Укр. біохім. журн.. - 2001. - 73, № 1. - С. 88-95. - Библиогр.: 24 назв. - рус.Подано матеріал щодо сорбції та десорбції концентрату інгібітора Кунітца - Нортропа на деяких сорбентах. Під час пропускання через колонку Дауекс-1 x 10 0,05 М гліцин-NaОН буфера, рН 10, знайдено дві фракції препарату, що мають інгібіторну активність, яка становить 100 %, а різні домішки, баластні білки залишаються на смолі. На колонках трипсин-сферон 300, трипсин-агароза, ангідрохімотрипсин-сферон 300 інгібіторний комплекс, прикріплений до сорбенту, відмивали від інертного матеріалу 0,1 М NаСl за умови рН 8,0, у той самий час як інгібітор відділяли від сорбенту дисоціацією цього комплексу за рН 1,7. Показано, що питома активність препарату зростала у 200 - 240 разів; ангідрохімотрипсин-сферон 300 інгібіторну активність на сорбенті виявлено в обох фракціях, одержаних як за рН 8,0, так і за рН 1,7. Найбільш ефективне знесолювання препарату знайдено під час використання діалізних мембран "Spectra/Por" (MWCо: 3000 - 5000 США). Дослідження інгібіторного пептиду методом електрофорезу у ПААГ показало, що стандартні SDS-системи зовсім неефективні. У зв'язку з цим використано ряд модифікацій цього методу і показано, що препарат має одну електрофоретичну полосу, яка відповідає молекулярній масі 6500 Да порівняно з молекулярною масою контрикалу та інших пептидів-маркерів. Однак у препараті вивченого інгібітора на старті, виявлено деякі білкові домішки. Під час дослідження гальмування трипсину інгібітором у різних концентраціях виявлено лінійну залежність інгібування ферменту в діапазоні концентрацій препарату від 1 до 9 мкг. Показано, що вагове і молярне співвідношення інгібітор/трипсин становить 1:1 і 1:3 відповідно. За розрахунками IUE інгібітора пригнічує 0,73 мг трипсину, IUE контрикалу - 0,15 мг ферменту, тобто в 4,6 рази менш активніший, ніж пептид, що досліджували. Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*725.314*725.111.434 + Г583
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ
Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|