Векліч Т. О. Вплив каліксаренфосфонових кислот на <$E bold roman {Nа sup + , K sup +}>-АТР-азну активність у плазматичній мембрані гладеньком'язових клітин / Т. О. Векліч, С. О. Костерін, Р. В. Родік, С. О. Черенок, В. І. Бойко, В. І. Кальченко // Укр. біохім. журн.. - 2006. - 78, № 1. - С. 70-86. - Бібліогр.: 50 назв. - укp.В експериментах, здійснених на суспензії плазматичних мембран клітин міометрія, оброблених 0,1 %-м розчином дігітоніну, вивчено вплив калікс[4]аренів C-97, C-99 та C-107, активованих фрагментами <$E alpha>-гідроксифосфонової, <$E alpha>-амінофосфонової та метилен-біс-фосфонової кислот, на активність уабаїнчутливої <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-ази та уабаїнрезистентної базальної <$E roman Mg sup 2+>-AТР-ази (питома активність - (<$E 10,6~symbol С~0,9>) та (<$E 18,1~symbol С~1,2>) мкМ Pi/год на 1 мг білка відповідно). Виявлено, що каліксаренфосфонові кислоти в концентрації 100 мкМ на 86 - 98 % інгібують активність <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-ази, практично не впливаючи на <$E roman Mg sup 2+>-AТР-азу. Ці каліксарени значно ефективніше, ніж уабаїн, пригнічують ферментативну активність натрієвої помпи - за дії каліксаренів значення уявної константи інгібування I0,5 становить <$E <<~0,1> мкМ, у той час як за дії уабаїну - 15 - 20 мкМ. Серед досліджуваних каліксаренів найбільше інгібує <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-азну активність каліксаренметилен-біс-фосфонова кислота - каліксарен C-97 (<$E roman I sub 0,5~=~33~symbol С~4> нМ). Інгібуючій дії каліксаренів, як і уабаїну, притаманна негативна кооперативність: коефіцієнт Хілла nн становить 0,1 - 0,5 (<$E <<~1>). Дослідження закономірностей впливу каліксарену C-97 на активність <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-ази свідчать, що інгібуюча дія його не пов'язана з тривіальною причиною - потенціально можливим зв'язуванням іонів Mg та (або) впливом цієї сполуки на взаємодію <$E roman Mg sup 2+> з <$E roman АТР sup 4-> в середовищі інкубації. Каліксарен C-97 не впливає на спорідненість ферменту до іонів Mg або АТР, однак знижує спорідненість <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-ази до іонів Nа (n = 6) - величина константи активації вірогідно збільшується від <$E 50~symbol С~4> в контролі до <$E 76~symbol С~6> мМ. При цьому практично не змінюється спорідненість до <$E roman K sup +>, але підвищується до уабаїну (величини константи інгібування I0,5 становлять (<$E 21~symbol С~5>) та (<$E 5,3~symbol С~0,7>) мкМ у контролі і за дії каліксарену відповідно). Дійшли висновку, що каліксарен C-97 є високоефективним (у порівнянні з уабаїном) і селективним (відсутній вплив на базальну <$E roman Mg sup 2+>-АТР-азу) інгібітором <$E roman {Na sup + , K sup +}>-АТР-ази плазматичної мембрани. Цей каліксарен (у концентрації 1 - 10 мкМ) доцільно використовувати в біохімічній мембранології для тестування та вивчення кінетичних і каталітичних властивостей натрієвої помпи на такій експериментальній моделі, як везикули плазматичної мембрани. Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*736.322*725.112.711.3
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|