Vorobyova N. V. Bacterial expression and isotope labeling of AIMP1/p43 codosome protein for structural studies by multidimensional NMR spectroscopy = Бактеріальна експресія та ізотопне мічення білка AIMP1/p43 кодосоми для структурних досліджень мультимірної ЯМР спектроскопії / N. V. Vorobyova, D. N. Lozhko, I. Yu. Zhukov, A. I. Kornelyuk // Biopolymers and Cell. - 2015. - 31, № 2. - С. 109-114. - Бібліогр.: 18 назв. - англ.AIMP1/p43 - структурний компонент мультисинтетазного комплексу (кодосома) евкаріот, проявляє тРНК зв'язуючу та цитокінову активність. Мета роботи - провести бактеріальну експресію та очистку ізотопно-міченого рекомбінантнога білка AIMP1/p43 в клітинах E. coli для вивчення його просторової структури за методами мультивимірної ЯМР спектроскопії. AIMP1/p43 був експресованний в клітинах E. coli BL21 (DE3) pLysE на мінімальному середовищі M9 з міченням ізотопом 15N та очищено за допомогою метал-хелатуючої хроматографії. Гетероядерні двомірні 1H-15N ЯМР експерименти проводилися в розчині за температури 293 К на ЯМР спектрометрі Agilent DDR2 800. Білок AIMP1/p43 було одержано в 15N-міченій формі як ЯМР зразок. Висока дисперсія сигналів у двомірниї ЯМР спектрах 1H-15N HSQC підтверджує наявність компактної тривимірної структури білка. ЯМР спектр AIMP1/p43 виявляє значне співвідношення сигнал-шум та достатню стабільність, щоб застосувати інші багатовимірні ЯМР експерименти, для визначення структури AIMP1/p43 білка у розчині. Висновки: 15N-мічений білок AIMP1/p43 зберігає стабільність протягом 4 - 7 днів, що надає змогу подальшого одержання важливих ЯМР експериментів для проведення детального структурного аналізу білка у розчині. Дані первинного аналізу спектрів ЯМР вказують на присутність деяких додаткових сигналів у порівнянні зі спектрами ЯМР EMAP II, які можуть бути віднесені до амінокислот N-кінцевого alpha-спірального фрагмента AIMP1/p43. Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*725.111.3*011.5
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ
Повний текст Наукова періодика України Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|