Смуток О. В. Оптимізація синтезу та розробка схеми очищення D-лактат: цитохром с оксидоредуктази рекомбінантного штаму дріжджів Ogataea (Hansenula) polymorрha "tr6" / О. В. Смуток, М. І. Карковська, Т. М. Прокопів, М. В. Гончар // Біол. студії. - 2018. - 12, № 1. - С. 5-16. - Бібліогр.: 15 назв. - укp.Здійснено оптимізацію умов синтезу D-лактат: цитохром с оксидоредуктази (КФ 1.1.2.4; DLDH) клітинами рекомбінантного штаму дріжджів Ogataea (Hansenula) polymorpha "tr6" (gcr1 catX -cyb2/DLD1). Штам характеризується порушенням глюкозної катаболітної репресії, делецією гена CYB2, що кодує L-лактат: цитохром с оксидоредуктазу, та шестикратним надсинтезом DLDH. Проведено виділення й очищення цільового ферменту з використанням іонообмінної хроматографії. Оптимізовано склад культурального середовища й умов культивування дріжджів для одержання біомаси клітин із найвищою питомою активністю DLDH. Аналіз ростової біомаси штаму O. polymorpha "tr6" виявив, що клітини рекомбінантних дріжджів найкраще ростуть на середовищі з 1 % гліцеролом і 0,5 % рацематом лактату, водночас найвища питома активність DLDH і найнижча неспецифічна фериціанідредуктазна активність спостерігаються під час вирощування клітин на середовищі з 1 % етанолом і 0,5 % рацематом лактату. Досліджено вплив деяких іонів двовалентних металів на активність DLDH у пермеабілізованих клітинах O. polymorрha "tr6". З'ясовано, що додаткове внесення в поживне середовище іонів Zn<^>2+ помітно підвищує активність DLDH у безклітинних екстрактах дріджджів. Виділення мембранозв'язаного ферменту DLDH здійснено з використанням методів фізичного руйнування клітин. Очищення DLDH проводили на іонообмінному сорбенті DЕАЕ-Toyopearl 650M. Вихід ферменту після хроматографічного очищення становив майже 50 %. Найвища питома активність в окремих фракціях зі семикратним ступенем очищення сягала 1,1 <$E roman {Од.~cdot~мг sup -1}>. Досліджено деякі фізико-хімічні властивості очищеного препарату DLDH рекомбінантного штаму дріжджів O. polymorpha "tr6". Індекс рубрикатора НБУВ: Е40*725.111.4*871
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж100193 Пошук видання у каталогах НБУВ
Повний текст Наукова періодика України Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) ![](/irbis_nbuv/images/info.png) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|