Мета роботи - виявлення і вивчення фізико-хімічних властивостей ензимного препарату, одержаного з культуральної рідини Pleurotus ostreatus. Фракцію, що містить протеїназу, було одержано з культуральної рідини за допомогою методу осадження хлоридом натрію з подальшим діалізом - концентруванням. Желатиназну і молокозгортальну активність визначали з застосуванням стандартних методів. Зміст протеїнового компонента фракції визначали за допомогою методів HPLC, електрофорезу за Лемлі та MALDI-TOF аналізу. Протеїназну активність вивчали ензим-електрофорезом. Для з'ясування специфічності дії протеїнази використовували низку хромогенних субстратів: S2238, S236, S2251, S2765, Leu-pNa, Ala-pNa і S2302. Інгібіторний аналіз проводили із застосуванням ЕДТА, бензамідином, ФМСФ, ПХМБ. Одержана фракція виявляла максимальну протеїназну активність за <$E45~symbol Р roman C>. Максимальну молокозсідальну активність спостерігали за <$E35~symbol Р roman C>. Найвищу молокозгортальну активність показано за pH 5,0 і менше 3,0. Найвища протеїназна активність була за pH 6,0. За допомогою методу HPLC було знайдено основний протеїновий компонент і деякі бічні протеїни. Згідно з результатами електрофорезу, основний протеїновий компонент фракції мав молекулярну масу 45 кДа. Ензиме-лектрофорез проведено з використанням фібриногену як стандартного субстрату. Встановленоно, що протеїназна активність фракції присутня в зоні, що відповідала масі 45 кДа. Під час ідентифікації продуктів трипсинолізу не виявлено гомології з іншими відомими протеїназами. Показано, що протеїназа гідролізує пептидні зв'язки, які утворені карбоксильною групою амінокислот з гідрофобними бічними ланцюгами. Ензим інгібували ЕДТА (ІС50 = 2,5 мМ). Максимальну активність ензиму з желатином і Leu-pNa спостерігали за присутності 5 мМ хлориду кальцію. У культуральній рідині P. ostreatus виявлено кальційзалежну металопротеїназу з молекулярної масою 45 кДа. Ензим гідролізував пептидні зв'язки, утворені карбоксильними групами амінокислот з гідрофобними бічними ланцюгами.

 Наукова періодика України 

---

Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
(cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)

• Корольова Дар'я Сергіївна (біологічні науки)
• Марунич Ростислав Юрійович (біологічні науки)
• Чернишенко Володимир Олександрович (біологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"