Konoval O. Generation of transgenic ducks by CRISPR/CAS9-mediated gene insertion combined with the sperm-mediated gene transfer (SMGT) = Генерація трансгенних уток шляхом CRISPR/CAS9-опосередкованої вставки генів в поєднанні з сперматозоїд-опосередкованим перенесенням генів (SMGT) / O. Konoval, P. Korol, P. Tabaka, S. Kostenko, L. Lizhi, A. Chepiha, M. Doroshenko, M. Drahulian, B. Xingchen, H. Xuetao, L. Liumeng // Biopolymers and Cell. - 2019. - 35, № 6. - С. 427-436. - Бібліогр.: 35 назв. - англ.Мета роботи - редагувати геном качки за методом HDR-спрямованої інтеграції гена EGFP в геном господаря в поєднанні з SMGT з використанням CRISPR/Cas9. Вставку HDR-опосередкованого гена зеленого флуоресцентного білка (EGFP) було досягнуто спільною дією чотирьох плазмід. Перша плазміда pX330 містила ген Cas9. Ще дві плазміди містили спейсери sgRNA: pBR322-sgRNA1 і pBR322-sgRNA2. Четверта плазміда pBR322-HDR-EGFP була сконструйована так, щоб вона містила вектор ДНК з лівою частиною гомологічної послідовності (LHP), кодуючою послідовністю гена EGFP і правою частиною гомологічної послідовності (RHP). Для конструювання HDR-EGFP-вставки і 20-нуклеотидних направляючих sgRNA 1 і sgRNA 2 дані було взято з даних послідовності геному "Anas platyrhynchos Spindlin 1 (SPIN1)" в базі NCBI. Для цього експерименту було використано 24 качки (13 самців і 11 самок) породи Шаосін. Трансфекцію сперматозоїдів здійснювали з використанням реагенту Lipofectamine 2000. Було одержано 31 качку, з яких 19 містили ДНК-трансгенну вставку, яку було визначено за методом ПЛР. Аналіз потомства (F2) показав, що всього 16 качок (F1) (14 самок і 2 самці) передали трансгенну ДНК своїм потомкам. Результати показали, що 27,6 % (56/203) нащадків F2 були позитивними щодо конструкції трансгенної ДНК. Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*440.4
Рубрики:
Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ Додаткова інформація про автора(ів) публікації: (cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці) Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"
|