Мета роботи - розробити новий метод визначення активності холінестерази, який має хорошу відтворюваність результатів експерименту, є швидкий, дешевий і забезпечує безпечні умови праці під час аналізу. Світлопоглинання досліджуваного та контрольного зразків вимірювали на фотоелектричному фотометрі КФК-3-01 (420 нм, l = 3 см). Швидкість реакцій характеризували значенням величини оптичної густини розчину (ОГР) через 10 хв (методом фіксованого часу). Вимірювання здійснювали за +37 <^>oC, підтримання температури реакційної суміші забезпечували за допомогою водяного термостата, рН розчинів контролювали потенціометрично за допомогою скляного електрода. Визначення ОГР повторювали 5 разів із кожним розчином певної концентрації ензиму. За отриманими пересічними даними будували градуювальну залежність питомої активності ензиму (у міжнародних одиницях (АО/мг) - кмоль/хв до 1 мг субстанції) від ОГР. За пересічним із п'яти визначень значенням оптичної густини випробуваного розчину за допомогою градуювального графіка знаходили питому активність ензиму (U). Суть методу полягає у фотометричному вимірюванні швидкості ферментативного гідролізу субстрату ацетилхоліну в буферному середовищі з використанням <$E 3,3 prime ,5,5 prime>-тетраметилбензидину (ТМБ). Реакцію ферментативного гідролізу субстрату проводили за рН 8,3, а через 10 хв після початку вимірювали швидкість ферментативного гідролізу ацетилхоліну. Лінійна залежність оптичної густини від питомої активності ензиму (U) спостерігалась в інтервалі 3,5 - 28 АО/мг. Активність ензиму за пересічними результатами 5 визначень становила 27,9 АО/мг (заявлена у сертифікаті якості питома активність становить 28 АО/мг). Межа кількісного визначення - 0,2 АО/мг. Метрологічні характеристики опрацьованого способу були такими: RSD = 1,8 % (n = 5; p = 0,95), правильність = 0,45 %. Це свідчить, що запропонований спосіб визначення активності холінестерази крові характеризується високою чутливістю, достовірністю та відтворюваністю результатів. Водночас доведено відсутність систематичної похибки під час здійснення визначення активності холінестерази опрацьованим методом. У результаті проведених досліджень було опрацьовано новий метод визначення активності ферменту холінестерази, який характеризується високою чутливістю, достовірністю та відтворюваністю результатів, а також надає можливість забезпечити безпечні умови праці під час виконання аналізу.

 Наукова періодика України 

---

Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
(cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)

• Блажеєвський Микола Євстахійович (1955–) (хімічні науки)
• Ковальська Олена Василівна (1985–) (фармацевтичні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"