Мета роботи - одним із підходів до вивчення структури та функції протеїнів є їх обмежений протеоліз. Отримані шляхом гідролізу фрагменти протеїнів також можуть мати біологічну активність, що може бути використано в дослідженні структурно-функціональних особливостей цих макромолекул. Тому актуальним є пошук селективних протеїназ і визначення специфічності їхньої дії. Досліджено дію протеїнази з отрути Gloydius halys halys (щитомордника звичайного) на фібриноген - основний протеїн системи згортання крові. Продукти гідролізу фібриногену протеїназою отрути G. halys halys досліджено за допомогою методів електрофорезу у поліакриламідному гелі та вестерн-блоту з використанням моноклональних антитіл II-5С (анти-A<$Ealpha>20-78) та 1-5A (анти-A<$E alpha>549-610). Молекулярну масу продуктів гідролізу визначено за допомогою MALDI-TOF мас-спектрометрії на Voyager DE PRO (США). Послідовності, які відщеплюються від фібриногену досліджуваною протеїназою, встановлено за допомогою програмного забезпечення "PeptideMassCalculator". Електрофоретичний аналіз показав, що протеїназа з отрути G. halys halys найбільш специфічно розщеплює A<$E alpha>-ланцюг молекули фібриногену. За допомогою вестерн-блот аналізу виявлено, що протеїназа відщеплює фрагмент із молекулярною масою приблизно 22 кDа від С-кінця A<$E alpha>-ланцюга молекули фібриногену. Відщеплюваний фрагмент ідентифіковано MALDI-TOF аналізом як поліпептид із масою 21,1 кDа. Згідно з програмою "PeptideMassCalculator", цей фрагмент відповідає послідовності A<$E alpha>414-610. Отже, протеїназа, виділена з отрути G. halys halys, cпецифічно гідролізує пептидний звязок A<$E alpha>K413-L414 з утворенням стабільної частково гідролізованої форми - фібриногену desA<$E alpha>414-610. Встановлено, що використовуючи досліджувану протеїназу, виділену з отрути G. halys halys, можна отримати унікальний частково гідролізований фрагмент фібриногену, позбавлений ділянки A<$E alpha>414-610, яка надасть змогу дослідити структурно-функціональні особливості <$E alpha>С-регіонів фібрин(оген)у.

 Наукова періодика України 

---

Додаткова інформація про автора(ів) публікації:
(cписок формується автоматично, до списку можуть бути включені персоналії з подібними іменами або однофамільці)

• Костюченко Олена Петрівна (біологічні науки)
• Чернишенко Володимир Олександрович (біологічні науки)

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"