Досліджено внутрішньовидову мінливість ізоферментних систем і можливості їх використання в селекції та генетиці соняшника. Визначено характер спадкування і генетичного контролю анодної естерази, катодної кислої фосфатази, катодної естерази та НАД-залежної малатдегідрогенази за допомогою електрофорезу в поліакриламідному гелі. Встановлено генетичний контроль генів анодної та катодної естерази в листках. Розглянуто міжлінійний поліморфізм, проведено біохімічну паспортизацію та класифікацію інбредних ліній соняшника , а також встановлено рівень гібридності простих гібридів соняшнику за допомогою ізоферментних систем. Досліджено можливість використання ізоферментних маркерів для прогнозування ефекту гетерозису у соняшника.

  Скачати повний текст

Розроблено методику культивування протопластів і регенерації рослин у люцерни, конюшини, гороху і у Oenothera hookeri. Протопласти сої, люпину, голубиного гороху при використанні розроблених методів культивування здатні до утворення клітинних колоній з високим ступенем ефективності. Отримано канаміцинстійкі рослини люцерни і клітинні лінії сої та гороху шляхом електропорації протопластів. Запропоновано метод, що підвищує ефективність трансформації у гороху та люцерни - "подвійна трансформація", що включає 1) отримання лінії рослин, які здатні до регенерації в культурі in vitro, за рахунок трансформації мутантом "shooty" A. tumefaciens pGV2206; 2) - трансформація ліній, які здатні до регенерації, селективним геном. Таким шляхом було отримано регенераційні лінії люцерни і гороху і далі трансгенні рослини гороху з Ds транспозоном кукурудзи та з геном стійкості до фосфінотрицину. Присутність генів в геномі рослин було доказано за допомогою методів полімеразної ланцюгової реакції, блот-гібридизації за Саузерном, NPT II аналізу, аналізу GUS активності, імуноферментного аналізу (ELISA). Міжвидові соматичні гібриди Medicago sativa_+ M.varia і M.borealis+ M.lupulina були отримані за допомогою асиметричної гібридизації. Хромосомний аналіз та блот-гібридизація рибосомальної ДНК підтвердили гібридну природу отриманих ліній. Було проведено гістологічний аналіз процесу регенерації у конюшини, гороху та цукрового буряка.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Розглянуто дані виходу пошкоджень ДНК у рослинних клітинах, що були опромінені з різною потужністю дози іонізуючим низькодозовим опроміненням. Досліджено вплив фактора потужності дози у низькодозовому діапазоні на характер виходу пошкоджень ДНК. Доведено, що потужність дози є важливим чинником у формуванні реакції відповіді клітин тютюну (Nicotiana tabacum) та сосни звичайної (Pinus silvestris), за критерієм виходу пошкоджень ДНК, на низькодозове опромінення. Залежності виходу пошкоджень ДНК від потужності дози опромінення мають складний характер і не корелюють з величиною потужності дози опромінення. За деяких режимів опромінення виявлено підвищений вихід пошкоджень ДНК у порівнянні з контролем. Встановлено факт реалізації прихованих пошкоджень в насінні сосни, що було опромінено в низькодозовому діапазоні. Визначено більшу радіочутливість паростків сосни, ніж протопластів даної рослини на вплив низькодозового опромінення.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Розроблено методи отримання трансгенних рослин у родині хрестоцвітих, а також досліджено взаємодію перенесених генів у трансформованих лініях. Оптимізовано методику генетичної трансформації за допомогою агробактерії трьох сортів рапсу і трьох сортів білоголовкової капусти. Запропоновано методику прямого переносу генів у мезофільні протопласти цвітної капусти з наступною регенерацією трансгенних рослин. За допомогою полімеразної ланцюгової реакції, саузерн-, нозерн-, вестерн-гібридизацій встановлено наявність і експресію сторонніх генів у трансформованих рослинах. Апробовано метод одночасного переносу кількох генів у геном арабідопсису шляхом трансформації in planta.

  Скачати повний текст

Вперше на клітинному та організмовому рівнях рослин з різним генотипом виявлено можливість індукції радіоадаптивної відповіді (РАВ) внаслідок впливу на насіння, що перебуває у стані спокою, адаптивною (окремо та сумісно мм-радіохвилями та гамма-радіацією) та тестовою (гамма-радіацією) дозами опромінення. Встановлено важливе значення рівня синхронізації першого мітозу під час проростання опроміненого насіння як показника стимуляції мітотичної активності за прояву РАВ. Виявлено зберігання прояву РАВ у поколіннях опроміненого насіння за комплексом показників (проліферацією клітин, ростовими реакціями, рівнем хромосомного мутагенезу, урожайністю).

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Одержано та досліджено дві регуляторні послідовності, що забезпечують коренеспецифічну та світлозалежну експресію химерних генів у бактеріальних і рослинних клітинах. Промотор, що має коренеспецифічні властивості, одержано в результаті клонування фрагментів ядерної ДНК тютюну перед кодувальною послідовністю безпромоторного гена неоміцинфосфотрансферази -II (npt-II). Підібрано фрагменти, що ініціюють транскрипцію у бактеріальних клітинах. Промоторну послідовність гена малої субодиниці рибулозо-1,5-дифосфаткарбоксилази (rbcS-3A) одержано шляхом її ампліфікації за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. Одержані послідовності проклоновано у плазмідних векторах. Рекомбінантні плазміди, що містять ці фрагменти перед репортерними генами, введені в клітини тютюну. Регуляторну активність й органоспецифічність доведено за допомогою генів npt-II хлорамфеніколацетилтрансферази (cat). У сконструйовані вектори введено ген металотіонеїна. Показано підвищену здатність трансгенних рослин до акумуляції іонів важких металів у клітинах органів з експресією гена металотіонеїну, що вибірково індукується досліджуваними промоторами.

  Скачати повний текст

Встановлено, що фенотиповим проявом алеля clv1-1 є три-чотиригніздий плід, який розкривається трьома-чотирма стулками - коробочка. Виявлено плейотропний ефект дії рецесивного алеля ap1-1 на чашолистки, пелюстки, тичинки та плодолистки, який призводить до зменшення середніх значень даних органів. Встановлено відмінність в організації геному ліній арабідопсиса NW20, N28, N45 та Lug228. Одержано нові три-, пента- та гептамутантні рецесивні лінії.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Із використанням методів клітинної селекції отримано новий високопродуктивний штам АЕ-3 з культивованих клітин арнебії барвної. Він накопичує під час вирощування як суспензійної культури до 8 % шиконіну у сухій тканині, вихід якої становить 16 - 18 г/л за 14 днів росту, або до 1,12 г шиконіну з 1 л суспензії за пасаж. У разі вирощування в рідкому живильному середовищі штам перевищує за накопиченням шиконіну вихідний штам АЕ-2 в 2,5 - 3,5 рази. Дослідження мінливості ознаки "вміст шиконіну" в сухій біомасі у клітинному штамі АЕ-2 та отриманому від нього штамі АЕ-3 показало її варіювання у широких межах. Встановлено, що фенотипова гетерогенність штаму АЕ-2 зумовлена, головним чином, спадковою гетерогенністю (коефіцієнт успадкування h² = +0,82), відселектованого від нього штаму АЕ-3 - переважно паратипічною мінливістю (h² = +0,07). Проведено порівняльний аналіз динаміки клітинних популяцій за параметрами росту, накопичення шиконіну, розмірів клітин і клітинних ядер і пошук можливих кореляцій між параметрами продуктивності та структурою клітинних популяцій у ході вирощування їх у суспензійній і калюсній культурах. Встановлено, що умови калюсної культури сприяють більш повній експресії ознаки "вміст шиконіну", ускладнюють характер експресії ознаки "накопичення біомаси", виявляють кореляцію показників продуктивності та динаміки кількості клітин і ядер великих розмірів. Такі ознаки, як характер похідних від кривої накопичення шиконіну, а також негативна кореляція між кривими накопичення біомаси і динамікою середніх за розмірами клітин і ядер, мало залежать від умов (способу) вирощування ізольованих клітин арнебії барвної. Вони, вірогідно, більшою мірою визначаються спадковими факторами. Ростові та біосинтетичні характеристики нового штаму АЕ-3 дозволяють рекомендувати його як об'єкт для біотехнологічного отримання шиконіну.

  Скачати повний текст

Дисертація присвячена отриманню трансгенних рослин тютюну та картоплі з експресією химерних генів, що направляється клонованими органоспецифічними промоторами. Злиттям мезофільних протопластів з плазмідною ДНК отримані трансгенні рослини тютюну з коренеспецифічною експресією гену Inpt-ІІD, що направляється клонованим промотором IгрS12D. В трансгенних рослинах картоплі, регенерованих з мікробульбочкових дисків після співкультивування з IAgrobacteriumD, продемонстрована бульбоспецифічна експресія генів IcatD та IhEGFD, що направляється промотором гену пататину lambda pat 122 та коренеспецифічна експресія гену IHBsAgD під контролем I35SD промотору IВМККD.

  Скачати повний текст

Уперше проаналізовано залежність виходу множинних хромосомних аьберацій, зокрема складні невизначені, від дози <$Egamma>-опромінення у рослин і показано, що процес утворення мультиаберантних клітин (МАК) не відбувається за законом випадкових подій, додаткові аберації з'являються у вже пошкоджених клітинах. Зауважено, що поява однієї аберації в клітині може сприяти появі інших пошкоджень. Запропоновано припущення щодо залежності частоти аберантних клітин та кількості аберацій щодо аберантної клітини від мутагенного навантаження, згідно якого значно більша кількість клітин з множинними абераціями хромосом індукується у разі високої частоти аберантних клітин у порівнянні з контролем. Зважаючи на спільність процесів утворення хромосомних аберацій в еукаріот це припущення пояснює відсутність чітких залежностей між дозою опромінення та появою МАК, що виявляється в популяційних дослідженнях різними авторами. Уперше за умов порівняння динаміки цитогенетичних показників двох видів Allium показано, що старіння насіння цибулі батун (A. fistulosum) супроводжується швидким наростанням частоти клітин з абераціями та появою мультиаберантних клітин, а у A. cepa виявлено більш повільне наростання мутаційного процесу, для якого виникнення МАК не є характерним.

  Скачати повний текст

Дисертація присвячена питанню дослідження радіобіологічних характеристик реакції надчутливості (РНЧ) у рослин тютюну Nicotiana sanderae заражених бактеріями Pseudomonas syringae pv. phaseolicola. При впливі гамма-випромінювання в дозах 50-600 Гр найбільшою радіочутливістю характеризувався етап взаємодії рослин і бактерій, коли відбувається індукція реакції рослини-господаря. Встановлено, що визначальною ланкою для розвитку РНЧ є функціональна активність бактеріальних клітин, які виявляють значну радіочутливість.

  Скачати повний текст

Здійснено порівняльне дослідження репродуктивної біології представників шести родин квіткових рослин (Annonaceae, Ericaceae, Anacardiaceae, Rhamnaceae, Davidiaceae, Oleaceae). Досліджено закономірності формування та будови елементів їх генеративної сфери, особливості насіннєвого відтворення. Вперше наведено ембріологічну характеристику Arbutus andrachne, Pistacia mutica, Davidia involucrata та істотно доповнено дослідження ембріології Asimina triloba, Zizyphus jujuba та Olea europaea. Визначено типи генеративних структур. Доведено висунуту гіпотезу про можливість подвійного шляху подальшого розвитку спорогенної тканини мікроспорангія та здатності її диференціюватися не лише в мікропороцити, але і в тапетум. Виявлено морфогенетичні кореляції у генезисі репродуктивних структур. Відзначено, що біологічна пластичність системи репродукції здійснюється системами несумісності та структурними особливостями квітки і має адаптивне значення. Підтверджено виділення роду Davidia в самостійну родину Davidiaceae та самостійного порядку Annonales. Встановлено явище гетеробатмії, яке свідчить, що еволюційні перетворення генеративної сфери відбуваються гетерохронно та не завжди співпадають з темпами еволюції інших морфологічних ознак, хоча і простежено тенденцію до прогресивної еволюції комплексу ознак. Висвітлено високу спеціалізацію елементів репродуктивної системи таксонів незалежно від їх філогенетичного рівня.

  Скачати повний текст

Запропоновано новий ефективний підхід щодо одержання транспластомних рослин для видів, які мають низький трансформаційний і регенераційний потенціал. Вперше одержано трасформовані пластоми рослин Salpiglossis sinuata, Scopolia carniolica, Physochlaine officinalis. Здійснено генетичну трансформацію пластомів, що функціонують у клітинах іншого виду. Проведено соматичну гібридизацію між рослинами Lycium barbarum та транспластомними представниками NIcotianf tabacum.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст