Досліджено особливості функціонування тирозинових протеїнфосфатаз (ТПФ-аз) у плазматичних мембранах, цитозолі спленоцитів та тимоцитів щурів через 12 годин після тотального рентгенівського опромінення у дозах 1,25; 0,5; 0,75 та 1,0 Гр. Виявлено найбільше зростання активності ТПФ-аз за умов впливу іонізуючої радіації у дозі 0,5 Гр, а для цитозольних ТПФ-аз спленоцитів - 0,25 Гр. Вивчено кінетичні властивості ізольованої ТПФ-ази CD 45. З'ясовано, що цей фермент більш споріднений з фосфатирозином, ніж з паранітрофеніфосфатом. Визначено, що опромінення тварин у дозі 0,5 Гр спричинює зниження спорідненості ферменту до фосфотирозину та зменшення максимальної швидкості фосфатазної реакції. Показано однонаправлені зміни активності тирозинових протеїнкіназ, ТПФ-аз та вмісту циклічних нуклеотидів у клітинах селезінки та тимусу щурів на тлі введення різних речовин за умов опромінення у низьких дозах.

  Скачати повний текст

Показано, що експресія генів 6-фосфофрукто-2-кіназа/фруктозо-2,6-бісфосфатаза (PFKFB)-4, PFKFB-3 та PFKFB-2 суттєво змінюється під впливом тривалої дії на організм метил-третбутилового ефіру у печінці, легенях і серці щурів і порушується альтернативний сплайсинг їх пре-мРНК. Виявлено новий альтернативний сплайс-варіант мРНК РРКРВ4, що індукується під впливом метил-третбутилового ефіру. Встановлено, що зміни в експресії генів PFKFB-3 та PFKFB-4 під впливом метил-третбутилового ефіру є тканино-специфічними та дозо-залежними. У печінці та легенях також виявлено зміни в альтернативному сплайсингу пре-мРНК PFKFB-2, в результаті чого посилюється експресія варіантів PFKFB без каталітичних доменів 6-фосфофрукто-2-кінази. Встановлено, що під впливом тривалої дії різних доз метил-третбутилового ефіру значно порушується експресія мРНК казеїнкінази-1є, циркадіальних транскрипційних факторів Рег2, ВМаll і Сlоск та протеїнкінази SNARK у печінці, легенях та міокарді щурів.

  Скачати повний текст

Уперше встановлено кінетичні закономірності інгібуючої дії відновленого глутатіону та дигідроліпоєвої кислоти на активність лужної фосфатази з кишок теляти. Показано, що вплив відновленого глутатіону описується закономірностями частково змішаного інгібування. Взаємодію L-цистеїну з лужною фосфатазою у центрі зв'язування субстрату охарактеризовано як двостадійний процес, за яким відбувається швидке утворення первинного комплексу та має місце повільна стадія формування наступного комплексу інгібітора з ферментом. Розраховано мікроскопічні константи швидкості повільної стадії взаємодії L-цистеїну з лужною фосфатазою з кишок теляти. Доведено, що більшу спорідненість до відновленого глутатіону та L-цистеїну проявляють гідрофільні фракції цього ферменту у порівнянні з гідрофобними, одержаними після його розділення на октилсефарозі. Доведено високу ефективність інгібіторів лужної фосфатази, що містять у своїй структурі гідрофобний калікс[4]арен як фундамент для одного або двох фрагментів метиленбісфосфонової кислоти.

  Скачати повний текст

Досліджено структурно-функціональні взаємозв'язки нових синтетичних інгібіторів з основним ферментом системи зсідання крові - тромбіном. Синтезовано новий клас ефективних і високоселективних інгібіторів тромбіну - ліпо-ретро-D-пептиди, у певних з них виявлено селективність до тромбіну більш, ніж у 5 000 разів за мікромолярних значень Ki. Вперше метод ALDI ToF MS використано для дослідження структурних особливостей інтактних білків. Наявність винятково осколкових іонів у спектрі тромбіну пояснено присутністю олігосахаридного залишку специфічної будови. Показано, що інгібітори на основі послідовності - D-Arg-D-Phe - впливають на інтенсивності осколкових іонів тромбіну на відміну від естерних похідних N-ациларгінінів.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Встановлено, що гліцерольна модель рабдоміолізу супроводжується активацією вільнорадикальних процесів та індукцією гемоксигенази в серці, судинах і легенях щурів, що обумовлено надходженням до цих тканин гему з кровотоку. За умов введення екзогенного геміну встановлено підвищення вмісту гему та гемоксигеназної активності лише в судинах.

  Скачати повний текст

Вперше доказано, що високо очищені рибосоми вищих еукаріот містять міцно зв'язану АТРазу та вивчено її властивості. Показано наявність двох активних центрів та виявлено стимулюючу дію аміноацил-тРНК на каталітичну активність одного з них. Отримано дані про участь рибосомної АТРази у контролі над функціонуванням А-сайта рибосоми, де відбувається відбір кодон-специфічних тРНК. Проведено порівняння рибосомної АТРази з дріжджовими EF-3 і виявлено ряд загальних властивостей. Встановлено, що рибосоми вищих еукаріот, маючи власну АТРазну активність, зберегли у процесі еволюції підсилюючий елемент(и), необхідний для стимуляції EF-3. Теоретичне значення роботи полягає у новому розумінні детальних механізмів циклу елонгації поліпептидного ланцюга на 80S рибосомі та виявленні нових можливих точок прикладання факторів, які регулюють біосинтез білка у вищих еукаріот.

  Скачати повний текст

Вперше доказано, що високо очищені рибосоми вищих еукаріот містять міцно зв'язану АТРазу та вивчено її властивості. Показано наявність двох активних центрів та виявлено стимулюючу дію аміноацил-тРНК на каталітичну активність одного з них. Отримано дані про участь рибосомної АТРази у контролі над функціонуванням А-сайта рибосоми, де відбувається відбір кодон-специфічних тРНК. Проведено порівняння рибосомної АТРази з дріжджовими EF-3 і виявлено ряд загальних властивостей. Встановлено, що рибосоми вищих еукаріот, маючи власну АТРазну активність, зберегли у процесі еволюції підсилюючий елемент(и), необхідний для стимуляції EF-3. Теоретичне значення роботи полягає у новому розумінні детальних механізмів циклу елонгації поліпептидного ланцюга на 80S рибосомі та виявленні нових можливих точок прикладання факторів, які регулюють біосинтез білка у вищих еукаріот.

  Скачати повний текст

  Скачати повний текст

Узагальнено результати вивчення функціонування епідермального ростового фактора (ЕРФ) - рецепторних тирозинових протеїнкіназ у лімфоцитах селезінки щурів за умов радіаційного впливу. Встановлено порушення активуючого ефекту епідермального ростового фактора на активність рецепторних тирозинових протеїнкіназ після дії рентгенівського випромінювання у дозі 1 Гр, яке супроводжуюється зміною взаємодії ферменту з субстратом фосфотрансферазної реакції - АТР. Виявлено інтенсифікацію процесу автофосфорилювання ЕРФ-рецепторних тирозинових протеїнкіназ, що обумовлено виникненням дисбалансу у функціонуванні системи рецепторних тирозинових фосфатаз, сАМР-залежне фосфорилювання є залученим до реалізації внутрішньоклітинних ефектів радіоіндукованої активації ЕРФ-рецепторних тирозинових протеїнкіназ у лімфоцитах селезінки.

  Скачати повний текст

Ідентифіковано нову ізоформу кофермента А (КоА)-синтази. Вперше показано, що фракція КоА-синтази у клітинах ссавців зазнає фосфорилування за тирозину, і таке фосфорилювання може впливати на її фосфопантетеїн-аденелілтрансферазну (ФПАТ) активність. Показано, що рівень експресії КоА-синтази впливає на активність РІ3К-залежного сигнального шляху й активність тирозинових кіназ. Вперше розглянуто, що рівень експресії КоА-синтази впливає на фенотипічні прояви злоякісної трансформації клітини, а саме: незалежний від контактів із позаклітинним матриксом ріст і виживання за умов відсутності ростових факторів у культурі in vitro.

  Скачати повний текст