Ключ. слова: signal transduction, CD150, lymphocytes, ERK, Akt
Індекс рубрикатора НБУВ: Р56-29

Рубрики:

Онкологія

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: З852.3

Рубрики:

Напівпровідникові тріоди (кристалічні тріоди, транзистори)

Шифр НБУВ: Ж69973 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Отмечено, что CD150 относится к новому суперсемейству клеточных поверхностных рецепторов CD2/CD150. Экспрессия данного рецептора обнаружена на активированных Т- и В-лимфоцитах, моноцитах и дендритных клетках. Показано, что CD150 играет двойную роль в регуляции клеточных программ лимфоцитов путем передачи положительных и отрицательных сигналов. Задачей данного исследования явилось изучение экспрессии CD150 в клетках некоторых нормальных тканей человека, а также в опухолях различного гистогенеза с использованием методов иммуногистохимии. В результате проведенного анализа установлено, что вне гемопоэтической системы рецептор экспрессирован на клетках базалиомы, плоскоклеточного рака шейки матки, пищевода, прямой кишки и ротовой полости. Данные опухоли имеют эктодермальное происхождение, однако на их нормальных аналогах экспрессия CD150 не наблюдалась. Детальное изучение неходжкинских лимфом и лимфогранулематоза показало, что CD150 экспрессируется на злокачественных клетках при Т-клеточной лимфоме, лимфомах из клеток мантийной зоны (слабая экспрессия) и при диффузных крупноклеточных В-клеточных лимфомах с фенотипом активированных В-клеток, что соответствует экспрессии CD150 на их нормальных аналогах. При лимфогранулематозе экспрессия наблюдалась в патогномоничных клетках Ходжкина и Березовского - Штернберга. При всех исследованных лимфомах, за исключением лимфомы из клеток мантийной зоны, CD150 коэкспрессирован с адапторным белком SH2D1A. В связи с тем, что SH2D1A вовлечен в регуляцию передачи сигналов через CD150, коэкспрессия этих двух молекул может быть связана с патогенезом лимфом.

Цель исследования: выяснить, какие сигнальные каскады опосредованы через CD150-рецептор в клеточных линиях лимфомы Ходжкина (ЛХ), а также способ их регулирования; изучить экспрессию сплайсинг-изоформ CD150-рецептора и адапторного белка SH2D1A на уровне мРНК при ЛХ и в клеточных линиях ЛХ. Экспрессию адапторного белка SH2D1A и сплайсинг-изоформ CD150 на уровне мРНК в образцах опухолей ЛХ и клеточных линиях определяли методом обратной транскриптазной реакции (RT-PCR). Локализацию CD150 и SH2D1A в клетках изучали методом двойного иммунофлуоресцентного окрашивания белков. Экспрессию белков SH2D1A, Syk, Lyn, SHP-2, SHIP, а также активированных ERK1/2 и Akt-белков определяли, используя специфические антитела в Вестернблот анализе. Показана экспрессия растворимой (sCD150) и полной трансмембранной (mCD150) сплайсинг-изоформ CD150-рецептора, а также SH2D1A-адапторного белка на уровне мРНК в 9-ти случаях классической ЛХ и в трех линиях клеток ЛХ В-клеточного происхождения - L428, KM-H2 и L1236. Несмотря на то, что CD150 и SH2D1A экспрессированы во всех изученных линиях клеток ЛХ, CD150 и SH2D1A совместно преципитируют и локализуются только в L1236-клетках. В то же время, связывание CD150 приводило к дефосфорилированию ERK1/2 в клеточной линии L1236 и никак не влияло на ERK-сигнальный каскад в линиях КМ-Н2 и L428. Akt-сигнальный каскад активировался через CD150-рецептор только в L1236-клетках. Выводы: злокачественные клетки при ЛХ экспрессируют sCD150 и mCD150 сплайсинг-изоформы и SH2D1A. Взаимодействие между CD150 и SH2D1A зависит от их локализации в клетке. В клеточных линиях ЛХ CD150 связан с ERK и Akt-сигнальными каскадами. Можно пр

едположить, что CD150-SH2D1A-взаимодействие играет решающую роль в CD150-опосредованной активации Akt-сигнального каскада в клеточных линиях ЛЧ. Как и в системе модели DT40, активация Akt через CD150-рецептор в клеточных линиях ЛХ не зависит от SHIP-фосфатазы.

Background: Infection of human B cells with Epstein - Barr virus (EBV) induces metabolic activation, morphological transformation, cell proliferation and eventual immortalization. Aim: To identify the nuclear receptors, which are the cellular interaction partners of EBNAs, that will help to elucidate the mechanism of B cell transformation. Methods: We have compared the nuclear receptor profile in the naive and EBV-transformed B-lymphocytes, using TaqMan LDA microfluidic card technology. Results: Out of 48 nuclear receptor, 17 showed differential expression at the mRNA level. The expression of 5 genes was elevated in EBV-transformed cells, whereas 12 genes were down-regulated in lymphoblastoid cells (LCLs). 7 genes were studied at the protein level; 2 genes were up regulated (Nr2F2 and RARA) and 4 genes were down regulated (ERB, NUR77, PPARG, and VDR) in LCLs. Conclusion: The nuclear receptor profiling on EBV infected B cells showed alterations of nuclear receptors expression at both mRNA and protein levels compared with non infected peripheral blood cells. Further analysis on a possible role of each nuclear receptor in EBV induced cell transformation should be performed.

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*732.242

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.413.3

Рубрики:

Лімфогранулематоз (хвороба Ходжкіна, злоякісна гранульома)

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*440.172

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*725.111.3

Рубрики:

Загальна біологія

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.413

Рубрики:

Пухлини лімфатичних вузлів

Шифр НБУВ: Ж21341/а Пошук видання у каталогах НБУВ 

Aim - to study upstream and downstream events in CD150-mediated Akt signaling pathway in normal human B cells, EBVtransformed lymphoblastoid (LCL) and malignant Hodgkin's lymphoma (HL) B cell lines. Methods: to access protein-protein interaction we applied immunoprecipitation, Western blot analysis and surface plasmon resonance (SPR) technique. A novel modification of SPR technique using reduced glutathione bound to golden surface was proposed. Immunostaining and isolation of cytoplasmic fractions and nuclear extracts were performed to detect proteins' localization in cells. Western blot analysis was performed to follow up the phosphorylation of proteins on specific sites and proteins' expression level. It was shown that CD150 ligation induced Akt activation in normal tonsillar B cells (TBC), SH2D1A positive LCL and HL B cell lines. The p85alpha subunit of PI3K co-precipitated with CD150 cytoplasmic tail. This direct association depends on tyrosine phosphorylation and is mediated by N terminal SH2 domain of p85alpha. CD150 initiated phosphorylation of FoxO1 transcription factor in normal B cells as well as in LCL MP-1 and HL cell line L1236. At the same time, CD150 ligation triggered GSK-3beta kinase phosphorylation only in immortalized LCL MP-1 and HL cell line L1236. Conclusions: we have demonstrated that CD150 receptor could trigger PI3K-mediated Akt signaling pathway in normal, EBV-transformed and malignant B cells. CD150-mediated phosphorylation of Akt downstream targets GSK-3beta and FoxO1 in EBV-transformed and HL cells could be one of the mechanisms to avoid apoptosis and support survival program in these immortalized B cells.

Aim - to study the differential expression of PKD1 and PKD2 in primary gastric cancer samples and to examine the role of PKD1 and PKD2 protein kinases in regulation of gastric tumor cell biology in the model system. Methods: tumor samples of different histological variants of primary gastric cancer were analyzed. PKD1 and PKD2 expression levels in tumor samples were accessed by Western blot analysis and quantitative polymerase chain reaction (Q-PCR). As a model system we have used gastric adenocarcinoma cell line AGS sublines constitutively transfected by pcDNA3.1 coding PKD1 or PKD2, or empty pcDNA3.1 vector. These cell lines were analyzed by Western blot, Q-PCR, MTT and proliferation assays, in vitro scratch and Transwell assays, clonogenic assay. It was found that primary gastric tumors possess different levels of PKD1 and PKD2 expression on mRNA and protein levels. Low level of PKD1 expression on protein and mRNA level was detected in low differentiated adenocarcinoma and ring cell gastric cancer - disorders with poor clinical prognosis. The high level of PKD2 expression was also found in gastric tumors with poor prognosis: low differentiated adenocarcinoma and adenogen cancer. To find out whether differential expression of PKD1 and PKD2 could affect biology of gastric tumor cells in vitro, we used a model system based on AGS cell line that constitutively expressed PKD1 or overexpressed PKD2. PKD1 transfection led to the inhibition of cell proliferation, migration and colony formation, in the meanwhile, the PKD2 overexpression enhanced proliferation, migration and colony formation capacities of AGS cells. Conclusions: our data suggest that both downregulation of PKD1 or upregulation of PKD2 expression may determine the behavior of gastric tumor cells, which promotes invasive phenotype and could result in general poor prognosis.

CD95, also called Fas or APO-1, was the first death receptor (DR) identified and characterized. Studies on CD95 receptor signaling revealed the versatile principles of cell fate regulation via DR. DRs could exert both pro- and anti-apoptotic effects depending on clustering, internalization or signaling thresholds and other extracellular signals. It became clear that molecular network regulating cell death and survival is under the multilevel control. In this Review we focus on the regulation of CD95 signaling and provide brief analysis of molecular switches of its pro- and antiapoptotic functions. At least five levels of life-death cell regulation via CD95 could be tracked: extracellular, membrane, DISC, mitochondrial, and miRNA. The cellular outcome of signaling via DRs depends on other extracellular signals and availability of different intracellular components of signal transduction pathways. This article is part of a Special Issue entitled "Apoptosis: Four Decades Later".

Шифр НБУВ: Ж28350 Пошук видання у каталогах НБУВ