Представлены данные по использованию современных морфоцитохимических и иммуноцитологических методов в диагностике опухолевых заболеваний кроветворной и лимфоидной тканей. За 7-летний период проведено обследование 4533 больных, включая детей, с острыми лейкозами миелоидного и лимфоидного происхождения из Киева, Крыма и 17 областей Украины. Проведено уточненное выделение различных форм и цитологических вариантов гемобластозов на основе современных классификаций, что имеет важное значение для определения прогноза и выбора оптимальных схем терапии.

Індекс рубрикатора НБУВ: Р562.1-29

Рубрики:

Рак

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ріст пухлинних клітин регулюється чергуванням станів латентності та різкого зростання. До того ж час перебування у кожному з них є величиною стохастичною. Розроблено стохастичну модель, що залежить від віку клітини, яка описує розвиток популяції пухлинних клітин. Отримано стохастичні характеристики кількості клітин у кожному зі станів у перехідному та стабільному режимах.

Описан простой, быстрый и эффективный метод выделения растворимых опухоль-ассоциированных белков из сыворотки крови онкологических больных. Метод основан на использовании гелевого стекловолокна (ГСВ) в аффинной хроматографии и колонок "Био-Гель Р-60", что позволяет выделять единичные белки из сыворотки крови. ГСВ представляет собой новый аффинный биосенсор для выделения антигена s53 человека при помощи кроличьего IgG анти-s53. Описанный метод можно использовать для очистки различных орган-специфических антигенов, представляющих интерес для биологии и медицины.

Определены концентрации тяжелых металлов и свободных радикалов в опухолевой и непораженной тканях почки человека. Концентрацию свободных радикалов в ткани измеряли с помощью оригинального супероксиддисмутазного биосенсора. Обнаружено, что в нормальной ткани почки определяется более высокая концентрация некоторых металлов (медь, кадмий, цинк), чем в опухолевой; в опухолевой ткани почки выявлено более высокое содержание свободных радикалов и ряда токсических веществ, в частности бензола, чем в непораженной, при более низкой концентрации таких поглотителей свободных радикалов, как цистеин. Пониженное содержание свободных радикалов в опухолевой ткани может быть обусловлено снижением активности супероксиддисмутазы и продукцией свободных радикалов в реакциях так называемого вторичного метаболизма ряда веществ, которые поступают в ткани организма из окружающей среды.

Обобщены результаты работы международных исследовательских групп и отдельных авторов по изучению лечебного действия рекомбинантных препаратов интерферона-альфа при неходжкинских лимфомах различной степени злокачественности, Т-клеточной лимфоме кожи, болезни Ходжкина и при различных формах лейкозов (хронический миелолейкоз, волосатоклеточный лейкоз, множественная миелома). В обзоре отражены также современные представления о некоторых механизмах противоопухолевого и противолейкозного действия интерферонов и перспективах их применения в виде монотерапии и совместно с некоторыми цитостатиками.

Проведен клинико-генеалогический анализ у 262 больных раком тела матки в Межрайонном онкологическом диспансере г. Белая Церковь (Киевская обл.). Получены сведения о заболеваемости у 1777 родственников первой степени родства и 2647 - второй. Родословные 41,22 пробандов были отягощены по онкопатологии: чаще отмечались больные раком тела матки, органов женской репродуктивной системы и желудочно-кишечного тракта. В 19 случаях обнаружены синхронные и метахронные первично-множественные опухоли. Следует предположить наличие общей преддиспозиции к развитию злокачественных новообразований как у пробандов с раком тела матки, так и у их родственников. Результаты исследования свидетельствуют о необходимости диспансеризации ближайших родственников пробанда с целью выявления ранних форм злокачественных опухолей в отягощенных по онкопатологии семьях.

При культивировании родительской линии Jurkat (Jurkat/WT) с апоптоз-индуцирующими мкАТ к антигену CD95 (клон IРО-4) получена сублиния клеток Jurkat/A4. В отличие от клеток линии Jurkat/WT, на поверхности которых экспрессируется антиген CD95 (60 - 80 % антигенположительных клеток), доля CD95-пoлoжитeльных клеток сублинии Jurkat/A4 снижается до 4 %. Клетки сублинии Jurkat/A4 резистентны к индукции апоптоза не только агонистическими aнти-CD95 мкАТ, но и противоопухолевыми цитостатиками разных классов, которые индуцируют апоптоз клеток родительской линии Jurkat/WT. Полученные результаты не противоречат гипотезе о возможной роли рецептора CD95 и его лиганда в реализации цитотоксического действия противоопухолевых препаратов различных классов и механизмов действия.

Гиперпродукция так называемых холодовых агглютининов (ХА) - аутоантител, которые реагируют с антигенами аутологичных эритроцитов человека, является признаком некоторых аутоиммунных заболеваний, но особенного масштаба она достигает при некоторых злокачественных новообразованиях крови, когда ХА имеют моноклональную природу. Доказано, что моноклональные ХА вырабатываются В-лимфоцитами, которые для построения тяжелых цепей иммуноглобулиновых рецепторов всегда используют один и тот же генный сегмент - V4-34. На основании данных доступной литературы и собственных экспериментов автор предлагает гипотезу, согласно которой существенная часть нормальных В-лимфоцитов периферической крови человека, которые экспрессируют продукт V4-34, обладает способностью реагировать с аутологичными эритроцитами и удаляется из репертуара иммунной системы благодаря механизму, напоминающему "бомбу замедленного действия". Этот механизм срабатывает тогда, когда аутореактивные лимфоциты активируются в периферических лимфоидных органах через рецептор CD40. Дефект в этом механизме негативной селекции, обусловленный действием онкогенных вирусов или других факторов, возможно, приводит к экспансии определенных аутореактивных клонов клеток, экспрессирующих ХА, и их злокачественной трансформации.

Индукцию апоптоза цисплатином, циклоплатамом, доксорубицином и этопозидом в клетках Jurkat исследовали с помощью метода проточной цитометрии в препаратах, окрашенных йодистым пропидием, а также методом TUNEL и по связыванию с меченым аннексином V. Несмотря на различия внутриклеточных мишеней, действие исследованных противоопухолевых препаратов на клетки во всех случаях приводило к развитию апоптоза, эффективность индукции которого зависела от дозы препарата и времени инкубации. Процент апоптических клеток, определяемых по методу TUNEL и по связыванию с меченым аннексином V, был выше такового, определяемого по связыванию с йодистым пропидием.

С помощью специфических иммунных сывороток против опухолеассоциированного белка pp23 из клеток гепатомы Зайдела и клеток почек интактных крыс при использовании иммуноблоттинга и аффинной хроматографии удалось установить иммунологическое сходство этих белков. Инкубация препаратов pp23, выделенных из клеток почек и гепатомы Зайдела, с культурой гепатоцитов интактных крыс в одинаковой степени способствует экспрессии мембранных опухолеассоциированных белков на поверхности гепатоцитов. На основании этих данных можно считать, что белки pp23, выделенные из клеток почек крыс и клеток гепатомы Зайдела, практически идентичны. Возможные отличия на молекулярном уровне не сказываются на их иммунологических и функциональных свойствах.

С помощью морфологического и цитофлуориметрического методов проанализированы особенности индукции апоптоза ингибитором ДНК топоизомеразы II - этопозидом - в злокачественных лимфоидных клетках линий Namalwa и CEM. Доказано, что B-клеточная линия Namalwa менее чувствительна к действию этопозида, чем T-клеточная линия CEM. Содержание апоптических клеток Namalwa составляло 5 % согласно данным морфологического анализа (окраска по Хехсту) и 13 % - согласно результатам проточной цитофлуориметрии. В то же время предварительная обработка клеток Namalwa ретиноидами повышает их чувствительность к апоптозиндуцирующему действию этопозида, что свидетельствует о способности ретиноидов модулировать развитие апоптоза в исследуемых злокачественных лимфоидных клеточных линиях.

Изучено влияние допамина (ДА) на гематотоксичность, обусловленную циклофосфамидом (ЦФ). ДА вводили мышам линии Swiss через 12 часов после ЦФ (200 мг/кг) в дозе 50 мг/кг в сутки на протяжении 5 суток показано, что при введении ДА нейтропения носит менее выраженный характер. Применение ДА снижает выраженность миелосупрессии, вызванной ЦФ. Результаты исследования свидетельствуют о том, что ДА способствует восстановлению кроветворения, угнетенного действием ЦФ, ускоряя возвращение гематологических параметров к норме. Таким образом, ДА может найти применение как препарат, восстанавливающий кроветворение, при цитотоксической химиотерапии пациентов с онкологическими заболеваниями.

В экспериментах на мышах с карциномой Льюис установлены противоопухолевый и антиметастатический эффекты D-пеницилламина. При введении мышам цинка сульфата наблюдалось усиление метастазирования. Комбинированное применение D-пеницилламина и цинка сульфата подавляло метастазирование только у 44 % животных.

Проанализированы изменения клеточного состава лимфоцитов селезенки и синтез белков, участвующих в регуляции апоптоза у потомства крыс с индуцированными опухолями молочной железы, матери которых содержались до и в период беременности на рационе, в состав которого входило 15 % оливкового или 7 % кукурузного масла. В возрасте 5 нед крысятам вводили дважды диметилбенз(а)антрацен (по 10 мг), после чего дальнейший анализ проводили в 3 группах животных, различающихся по рациону. Контрольной группой были крысята, которые содержались на рационе с 7 % кукурузного масла и родились от матерей, содержащихся в период беременности на этом же рационе. Опытными группами были крысята, родившиеся от матерей, которые содержались в период беременности на рационе с 15 % оливкового масла. При этом одна из опытных групп продолжала получать рацион с 15 % оливкового масла, тогда как другую переводили на рацион с 7 % кукурузного масла. Результаты эксперимента учитывали через 4 мес. Лимфоидные клетки в селезенке и инфильтратах опухолей анализировали иммуногистохимически, определяли В- и Т-клетки, а также синтез в этих клетках белков, ассоциированных с апоптозом (Fas-лиганд, р53, Всl-2). Результаты эксперимента в группах крысят, матери которых содержались на рационе с 15 % оливкового масла, зависели от того, на каком рационе в дальнейшем содержалось их потомство. При содержании матерей на рационе с 15 % оливкового масла, а потомства - на контрольном рационе в селезенке отмечалось уменьшение размеров зон, содержащих В- и Т-лимфоциты.

Если же крысята продолжали получать рацион с 15 % оливкового масла, у них отмечали признаки активации лимфоидной системы. При этом влияние такого рациона было различным в разных зонах селезенки. Увеличение размеров зародышевых центров селезенки, связанное с активацией продукции В-клеток, у потомства матерей, содержавшихся в период беременности на рационе с 15 % оливкового масла, было очевидным даже у крысят, которые перешли на контрольный рацион. Рацион с 15 % оливкового масла оказывал влияние и на состав лимфоидно-макрофагальных инфильтратов индуцированных опухолей молочной железы. Полученные данные свидетельствуют о том, что содержание крыс в период беременности на рационе с 15 % оливкового масла оказывает модулирующее действие на процессы индуцированного канцерогенеза у потомства.

У 32 больных с серозными эпителиальными опухолями яичников различной степени дифференцировки определена экспрессия белков - регуляторов апоптоза p53, Bcl-2 и антигена, ассоциированного с пролиферацией клеток (АПК). Установлено, что избыточная экспрессия мутантного белка p53 и АПК характерна для низкодифференцированных злокачественных опухолей яичников, отличающихся крайней степенью злокачественности, агрессивным течением заболевания и обширной распространенностью процесса по классификации FIGO (IIIc и IV). Опухоли с высокой степенью дифференцировки отличаются отсутствием экспрессии мутантного белка p53, низким индексом пролиферации опухолевых клеток и повышенной экспрессией белка Bcl-2. Определение экспрессии белков p53, Bcl-2 и АПК в ткани опухолей яичника, на основе полученных данных, может быть использовано для прогноза заболевания и коррекции терапии.

Рассмотрен принцип диагностики злокачественных лимфом в соответствии с новой классификацией ВОЗ. Обычные гистопатологаческие критерии обеспечивают 80 - 95 % воспроизводимость диагностики отдельных нозологических форм. Иммуногистохимические методы с использованием широкой панели моноклональных антител для распознавания опухолей В-, T- и ЕК-клеточного происхождения применяют выборочно. Детально описаны критерии, позволяющие выделять опухоли, возникающие из лимфоидных клеток-предшественников и зрелых (периферических) лимфоцитов различного происхождения. Приведена гастоморфологическая, иммунофенотипическая характеристика В-клеточных лимфом из малых лимфоцитов, В-ХЛЛ, лимфомы из клеток мантийной и маргинальной зоны, фолликулярной и лимфоплазмоцитарной лимфомы, В-крупноклеточной лимфомы и лимфомы Беркитта, Т-клеточных лимфом, лимфомы Ходжкина.

Методом иммунопреципитации с использованием органоспецифической антипочечной сыворотки идентифицирован мембранный гетероорганный антиген МА-50 в составе клеток асцитной гепатомы Зайдела крыс. Специфическое связывание органоспецифической антипочечной сыворотки и моноспецифической сыворотки против МА-50 с поверхностью культивируемых клеток гепатомы НТС и неопухолевых миогенных клеток L6 свидетельствует об экспрессии на их наружных мембранах исследуемого гетероорганного антигена МА-50. Исследовали влияние указанных иммуносывороток на синтез ДНК в этих культивируемых клетках. Показано, что ингибирующий эффект поликлональных антител зависит от их концентрации в среде и варьирует в пределах 13 - 53%. Представленные результаты позволяют сделать вывод о причастности исследуемого антигена к процессу клеточной пролиферации.

Магнитно-резонансная (МР) томография, как и МР спектроскопия, играют большую роль в исследованиях, проводимых с целью изучения механизмов взаимодействия метаболизма опухоли и ее васкуляризации. С помощью данных методов можно исследовать динамику такого взаимодействия по мере роста опухоли, а также в процессе лечения больных. Рассмотрено значение васкуляризации опухоли и показано, как МР томография и МР спектроскопия обеспечивают "проникновение" в васкуляризацию опухоли.

Антимикробные пептиды (АП) составляют важное звено в местном антимикробном ответе в тканях млекопитающих. Дефенсины и функционально родственные пептиды обнаружены не только в фагоцитах, но также в клетках тонкого кишечника и дыхательных путей. Подобно пептидным гормонам, они продуцируются в результате поэтапного тканеспецифичного протеолитического процессинга высокомолекулярных предшественников. Спектр антимикробного действия АП включает Гр+ и Гр- бактерии, микобактерии, многие грибы и некоторые упакованные вирусы. Помимо антимикробной функции, пептиды, подобные дефенсинам, участвуют в развитии воспалительных реакций и в процессах регенерации тканей, а также обладают цитотоксическими свойствами по отношению к клеткам опухолей. Благодаря высокой активности и сравнительно низкой токсичности в будущем АП, возможно, найдут применение в терапии инфекционных и онкологических больных.