Ключ. слова: chaperon, dyshormonal breast diseases, breast cancer
Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.133.1-45

Рубрики:

Пухлини молочних (грудних) залоз

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: p70S6Kalpha, p70S6Kbeta, expression, tumor, adenocarcinoma, uterus
Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.716.1

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: p70S6 kinase, Guerin's carcinoma
Індекс рубрикатора НБУВ: Р562.9-3

Рубрики:

Інші види пухлин

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

С помощью метода двугибридной системы дрожжей идентифицированы новые партнеры фосфатазы PTEN. Сконструированные байт-конструкты, содержащие C-концевой участок, дикую, мутантную активированную и неактивную dead-формы, проверены в тестах на экспрессию, проникновение в ядро и самоактивацию с использованием стандартного протокола Duplex A системы. Выполнен двугибридный скрининг кДНК библиотек рака кишечника, HeLa и эмбриона мыши с последующим отбором позитивных клонов с помощью метода полового слияния. Последовательности идентифицированы с помощью сиквенс-анализа и поиска гомологии в базах данных. Скрининг кДНК библиотек с помощью полноразмерной формы PTEN и его C-концевого домена позволил отобрать 43 положительных клона, подтвержденных методом полового слияния. Анализ последовательностей выявил, что два из них кодируют AEBP1 (Adipocyte Enhancer Binding Protein 1). Согласно данным, взаимодействие между PTEN и AEBP1 опосредовано их C-концевым и N-концевым участками соответственно. Функциональное значение PTEN-AEBP1 взаимодействия изучается.

Ключ. слова: p70S6 kinase alpha, thyroid gland, diffuse toxic goiter, papillary carcinoma, immunohistochemistry
Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.452 + Р415.120.26

Рубрики:

Пухлини щитоподібної залози

Зоб

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Экспрессирована рекомбинантная S6K2 в бакуловирусной системе. Выделены препаративные количества гомогенного белка для биохимических исследований. Получены и охарактеризованы специфические моноклональные антитела против рекомбинантной S6K2. Изучены экспрессия и внутриклеточная локализация S6K1 и K2 в злокачественных и доброкачественных опухолях молочной железы по сравнению с аналогичными нормальными тканями. Рекомбинантный бакуловирусный вектор, экспрессирующий S6K2 дикого типа, создан с помощью Bac-to-Bac системы (Invitrogen); рекомбинантная S6K2 очищена из инфицированных Sf9 клеток с помощью метода афинной хроматографии. Получены моноклональные антитела против рекомбинантной S6K2. Специфичность полученных антител в реакции с рекомбинантной и эндогенной S6K2 изучена с помощью методов ELISA, Вестерн-блоттинга, иммунопреципитации и иммуногистохимического окрашивания. Для иммуногистохимического определения S6K1 и S6K2 в нормальных и опухолевых тканях молочной железы использовали моноклональные антитела против S6K1 и К2. Препаративные количества ферментативно активной S6K2 получали с использованием бакуловирусной экспрессирующей системы. Для получения и характеристики моноклональных антител применяли высокогомогенные препараты S6K2. В опухолях молочной железы выявлен повышенный уровень экспрессии S6K1 и S6K2 по сравнению с таковым в аналогичных нормальных тканях. S6K2 часто локализовалась в ядрах аденокарцином, но редко в фиброаденомах и нормальных тканях молочной железы. Сделан вывод, что получение препаративных количеств рекомбинантной S6K2 и

создание специфических моноклональных антител к S6K2 - эффективный способ изучения функции и регуляции этой важной сигнальной молекулы в нормальных и опухолевых клетках. Иммуногистохимический анализ экспрессии S6K1 и K2 в нормальных тканях и злокачественных опухолях молочной железы подтверждает их повышенную экспрессию в последних. Накопление S6K2 в ядрах раковых клеток может быть связано с нарушением ядерно-цитоплазматических перемещений, а следовательно, может нарушать клеточный рост и пролиферацию.

Отмечено, что в настоящее время для выявления опухолеассоциированных антигенов применяются методы клонирования эпитопов для Т-клеток с целью выявления мишеней клеточного иммунного ответа, а также серологический анализ кДНК-экспрессирующих библиотек (SEREX) для обнаружения антител гуморального иммунного ответа. Для определения опухолевых антигенов, вызывающих появление антител в сыворотке крови пациентов с опухолью толстой кишки, применен метод SEREX. Идентифицированы пять различных антигенов, иммунореактивных по отношению к аутологичной сыворотке и обозначенных KY-CC-1-3, -21, -22. Гетерологичный иммуноскрининг указанных антигенов с использованием набора сывороток здоровых доноров и пациентов с опухолями пищеварительного тракта продемонстрировал, что антиген KY-CC-3/COX1, который, по данным литературы, ассоциирован с развитием тиреоидита Хашимото, может представлять опухолеассоциированный антиген. Данные свидетельствуют о том, что применение в серологическом анализе капельного метода нанесения бактериофага является оптимальным для стандартизации процедуры гетерологичного иммуноскрининга, представляющего наиболее критический этап в SEREX-методологии. Обсуждены трудности и возможные пути повышения эффективности SEREX-анализа при раке толстой кишки.

Проанализированы экспрессия и особенности локализации S6K в аденомах и аденокарциномах молочной железы человека и в нормальных тканях молочной железы. Уровень экспрессии и локализация S6K проанализированы в гистологических срезах нормальной ткани молочной железы человека, аденом и аденокарцином разной степени дифференцировки, предварительно фиксированных формалином и заключенных в парафин. Иммуногистохимическую детекцию S6K1 и S6K2 в эпителиальных клетках молочной железы осуществляли с помощью специфических моноклональных и поликлональных антител к S6K1 и S6K2 с последующим полуколичественным анализом данных. Обнаружено повышенное содержание S6K в цитоплазме опухолевых клеток эпителиального происхождения доброкачественных и злокачественных опухолей молочной железы по сравнению с эпителиальными клетками нормальной ткани. В аденокарциномах выявлено накопление в ядрах опухолевых клеток S6K1 и в большей степени S6K2. В 80 % аденокарцином молочной железы детектировано ядерное окрашивание S6K2 по сравнению с нормальными тканями. В 31 % случаев почти в 50 % опухолевых клеток наблюдалось сильное окрашивание ядер. Ядерная локализация S6K1 в опухолевых клетках установлена в 25 % аденокарцином. В эпителиальных клетках нормальной ткани молочной железы ядерная локализация S6K не обнаружена. Сделан вывод, что иммуногистохимический анализ свидетельствует о гиперэкспрессии обеих форм S6K (S6K1 и S6K2) в опухолях молочной железы человека. Полуколичественный анализ особенностей локализации S6K в эпителиоцитах молочной железы свидетельствует о высоком содержании S6K (особенно S6K2) в нуклеоплазме, что является характерной особенностью

опухолевых клеток.

Ключ. слова: S6K1, S6K2, S6 protein, expression, immunohistochemistry, endometrial adenocarcinoma
Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.714.1-43

Рубрики:

Пухлини матки

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Ключ. слова: S6K1, S6K2, Ki-67, PCNA, immunohistochemistry, breast adenocarcinoma
Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.133.1-2

Рубрики:

Пухлини молочних (грудних) залоз

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Мета: клонувати, експресувати у бакуловірусній системі (БВС) та очистити пухлинний антиген SSX2 та використати його для скринінгу сироватки крові здорових донорів та хворих на меланому. Матеріали та методи: використано БВС експресії, метод афінної хроматографії на Ni-NTA агарозі, імуноферментний аналіз для скринінгу сироватки крові хворих на меланому (n = 29) та здорових донорів (n = 27). Результати: з використанням БВС експресії клоновано та експресовано рекомбінантний антиген SSX2; SSX2 був очищений методом афінної хроматографії та використаний як антиген для ELISA. Порівнювальний аналіз сироваток крові хворих на меланому та здорових донорів виявив більш високий рівень SSX2 в сироватках хворих на меланому у порівнянні з таким у здорових донорів. Висновки: SSX2 антиген, експресований у БВС, можна застосовувати для серологічного аналізу сироватки крові онкологічних хворих.

Ключ. слова: tuberous sclerosis, TSC1/2, yeast two-hybrid system, protein-protein interactions
Індекс рубрикатора НБУВ: Р56-29

Рубрики:

Онкологія

Шифр НБУВ: Ж14160 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: В374 + В372.4

Рубрики:

Оптичні властивості твердих тіл. Оптичні властивості кристалів (кристалооптика)

Аморфний (склоподібний) стан твердого тіла

Шифр НБУВ: Ж16425 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Мета дослідження - одержання моноклональних антитіл проти N-кінцевої регуляторної ділянки кінази рибосомного білка S6-S6K1, який має низький рівень гомології з ізоформою S6K2 з використанням методів гібридомної технології, ІФА, Вестерн-блоту, імунопреципітації. Створено три гібридомні клони (A1, A2 і A3), які продукують моноклональні антитіла, специфічні до кінази S6K1. Одержані моноклональні антитіла за своїми характеристикам можна використовувати для дослідження S6K1-залежних сигнальних шляхів.

The aim of present study was to develop a model for a functional analysis of a recently identified marker of the ovarian cancer - sodium-dependent phosphate transporter NaPi2b. For this purpose, we have created HEK293 stable cell lines expressing wild type or mutant forms of NaPi2b (T330V substitution in a large extracellular loop and a 6 amino acid residues deletion in the C-terminal cytoplasmic tail), revealed in the ovarian cancer cell lines. The expression of wild type and mutant forms NaPi2b in the stable cell lines created was confirmed by Western-blot analysis with monoclonal antibodies against NaPi2b. The cellular models described here will be useful for studying the function of sodium-dependent phosphate transporter NaPi2b in health and disease.

Індекс рубрикатора НБУВ: Р569.715.2-4

Рубрики:

Пухлини яєчників

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*550*72 + Е60*725.111.46

Рубрики:

Загальна зоологія

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е60*725.111.46 + Е623.36*72

Рубрики:

Загальна зоологія

Mammalia Ссавці. Теріологія

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е70*725.111.3

Рубрики:

Біологія людини

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ 

Індекс рубрикатора НБУВ: Е0*725.111.42

Рубрики:

Загальна біологія

Шифр НБУВ: Ж14252 Пошук видання у каталогах НБУВ